HROC222 الفصل الدراسي الأول، الأسبوع الثاني

HROC222 T1 M2 هو خط خلايا سرطانية غدية في القولون والمستقيم البشري تم إنشاؤه ضمن مجموعة نماذج HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) من ورم أولي تم استئصاله من مريض بالغ. يشير التسمية "T1" إلى أن العينة تم الحصول عليها في أول مرحلة جراحية، بينما يشير "M2" إلى النموذج المختبري المقابل الذي تم إنشاؤه من هذا الورم. تدمج منصة HROC بين البنوك الحيوية الشاملة، والتعليقات الجزيئية الموحدة، وإنشاء متوازٍ لزرع الأعضاء المأخوذة من المرضى (PDX) وخطوط الخلايا الدائمة منخفضة التمرير، مما يتيح نماذج بحثية مترجمة مع تعليقات سريرية.

تم إنشاء HROC222 T1 M2 باتباع إجراءات موحدة تتضمن الفصل الميكانيكي للأنسجة السرطانية المقطوعة حديثًا، وإعداد معلقات خلايا مفردة، وزرعها على لوحات استزراع مغطاة بالكولاجين في وسط استزراع خلايا سرطانية محدد مضاف إليه الجلوتامين والمضادات الحيوية ومضادات الفطريات. عبر مجموعة HROC، تم إنشاء خطوط خلايا سرطان القولون والمستقيم الأولية الدائمة بنجاح من حوالي 13٪ من العينات التي تمت تجربتها. حدد التحليل الإحصائي أن درجة الورم الأعلى ترتبط بشكل كبير بنجاح إنشاء خط الخلايا الأولية، في حين أظهرت حالة العقد المتقدمة اتجاهاً إيجابياً. في التحليل متعدد المتغيرات عبر المجموعة، ظهرت إصابة العقد كمتنبئ مستقل لنجاح إنشاء النموذج.

تشمل مجموعة HROC جميع الأنواع الفرعية الجزيئية الرئيسية لسرطان القولون والمستقيم، بما في ذلك عدم الاستقرار الكروموسومي (CIN)، والنمط الظاهري لميثيلات جزيرة CpG (CIMP)، والأورام المستقرة الميكروساتلية (MSS)، والأورام عالية عدم الاستقرار الميكروساتلية (MSI-H)، بالإضافة إلى خلفيات طفرات متنوعة تؤثر على الجينات المحركة الرئيسية مثل KRAS و BRAF و TP53 و APC و PIK3CA. تم إنشاء HROC222 T1 M2 ضمن هذا الإطار المحدد بدقة، مما يسمح بالتكامل مع البيانات السريرية المرضية والجزيئية التفصيلية، وحيثما كان ذلك متاحًا، المواد PDX المقابلة. كنموذج لسرطان القولون والمستقيم منخفض التمرير ومشتق من المرضى، فإن HROC222 T1 M2 مناسب لإجراء أبحاث حول بيولوجيا الأورام، والعلاقات بين النمط الجيني والنمط الظاهري، والاختبارات العلاجية قبل السريرية في إطار أبحاث الأورام الدقيقة.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان