Премини към съдържанието
HROC222 Т1 М2
Тъкан
Напречно дебело черво
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Неприложимо (първичен тумор на напречното дебело черво; T1 M2 обозначава първия хирургичен момент, in vitro модел 2)

Документи

HROC222 Т1 М2

Cell line · Номер на продукта 300859

HROC222 T1 M2 е клетъчна линия от човешки колоректален аденокарцином, създадена в рамките на колекцията от модели HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) от...

€800.00без ДДС и доставка
Изработва се по поръчка
1

01Обща информация

Описание

HROC222 T1 M2 е човешка клетъчна линия на колоректален аденокарцином, създадена в рамките на колекцията от модели HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) от първична туморна резекция на възрастен пациент. Означението „T1“ показва, че пробата е получена при първата хирургична интервенция, а „M2“ обозначава съответния in vitro модел, създаден от този тумор. Платформата HROC интегрира цялостно биобанкиране, стандартизирано молекулярно анотиране и паралелно създаване на ксенографти, получени от пациенти (PDX), и постоянни клетъчни линии с нисък пасаж, което позволява клинично анотирани транслационни изследователски модели.

Генерирането на HROC222 T1 M2 следва стандартизирани процедури, включващи механично разграждане на прясно резецирана туморна тъкан, подготовка на суспензии от единични клетки и засяване върху покрити с колаген културални плаки в определена туморна клетъчна културална среда, допълнена с глутамин, антибиотици и антимикотици. В кохортата HROC постоянни първични клетъчни линии на колоректален рак бяха успешно създадени от приблизително 13% от пробите, върху които бяха направени опити. Статистическият анализ идентифицира по-високата степен на тумора като значително свързана с успешното създаване на първична клетъчна линия, докато напредналото състояние на лимфните възли показа положителна тенденция. В многовариантния анализ на колекцията участието на лимфните възли се оказа независим предиктор за успеха на създаването на модела.

Колекцията HROC обхваща всички основни молекулярни подтипове на колоректален карцином, включително хромозомна нестабилност (CIN), фенотип на метилатор на CpG острови (CIMP), микросателитна стабилност (MSS) и микросателитна нестабилност с висока степен (MSI-H), както и разнообразни мутационни фонове, засягащи ключови гени като KRAS, BRAF, TP53, APC и PIK3CA. HROC222 T1 M2 е създаден в рамките на тази строго характеризирана рамка, което позволява интеграция с подробни клиникопатологични и молекулярни данни и, когато е наличен, съответния PDX материал. Като модел на колоректален карцином с нисък пасаж, получен от пациент, HROC222 T1 M2 е подходящ за изследвания на туморната биология, взаимоотношенията между генотип и фенотип и предклинични терапевтични тестове в рамките на прецизната онкологична научна дейност.

Тъкан
Напречно дебело черво
Заболяване
Аденокарцином
Място на метастазите
Неприложимо (първичен тумор на напречното дебело черво; T1 M2 обозначава първия хирургичен момент, in vitro модел 2)
Приложения
Изследвания в областта на CRC; колоректален аденокарцином; биобанка HROC Linnebacher; лекарствена чувствителност; биология на тумора; интеграция на PDX и in vitro

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
Без ГМО
Подробности относно статуса на ГМО
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки

04Идентификатори

Източник
HROC222 T1 M2 (каталожен номер 300859 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_VQ93

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
На всеки 3 до 5 дни
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
79 години
Етническа принадлежност
Кавказки