- Weefsel
- Dwarse dikke darm
- Ziekte
- Adenocarcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Niet van toepassing (primaire tumor in de transversale colon; T1 M2 verwijst naar het eerste chirurgische tijdstip, in-vitro-model 2)
Documenten
HROC222 T1 M2
Cell line · Productnummer 300859
HROC222 T1 M2 is een menselijke celijn van colorectaal adenocarcinoom die is opgezet binnen de HROC-modelcollectie (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) op basis van een pr...
Maatwerk / Aanbevelingen
- HROC222 T1 M2Cell line€800.00
01Algemene informatie
- Beschrijving
HROC222 T1 M2 is een menselijke colorectale adenocarcinoomcellijn die is opgezet binnen de HROC-modelcollectie (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) op basis van een primaire tumor die bij een volwassen patiënt is verwijderd. De aanduiding "T1" geeft aan dat het monster werd verkregen tijdens de eerste chirurgische ingreep, terwijl "M2" verwijst naar het overeenkomstige in-vitromodel dat uit deze tumor werd gegenereerd. Het HROC-platform integreert uitgebreide biobanking, gestandaardiseerde moleculaire annotatie en parallelle oprichting van van patiënten afkomstige xenotransplantaten (PDX) en permanente cellijnen met een laag aantal passages, waardoor klinisch geannoteerde translationele onderzoeksmodellen mogelijk worden.
De generatie van HROC222 T1 M2 volgde gestandaardiseerde procedures, waaronder mechanische dissociatie van vers verwijderd tumorweefsel, bereiding van suspensies van afzonderlijke cellen en zaaien op met collageen gecoate kweekplaten in een gedefinieerd tumorcelkweekmedium aangevuld met glutamine, antibiotica en antimycotica. In het HROC-cohort werden met succes permanente primaire colorectale kankercellijnen opgezet uit ongeveer 13% van de geprobeerde monsters. Statistische analyse wees uit dat een hogere tumorgraad significant geassocieerd was met het succesvol opzetten van primaire cellijnen, terwijl een gevorderde lymfeklierstatus een positieve trend vertoonde. In multivariate analyse van de hele collectie bleek lymfeklierbetrokkenheid een onafhankelijke voorspeller te zijn voor het succes van het opzetten van modellen.
De HROC-collectie omvat alle belangrijke moleculaire subtypes van colorectaal carcinoom, waaronder chromosomale instabiliteit (CIN), CpG-eilandmethylatorfenotype (CIMP), microsatellietstabiele (MSS) en microsatellietinstabiliteit-hoge (MSI-H) tumoren, evenals diverse mutatieachtergronden die van invloed zijn op belangrijke drivergenen zoals KRAS, BRAF, TP53, APC en PIK3CA. HROC222 T1 M2 is gegenereerd binnen dit rigoureus gekarakteriseerde kader, waardoor integratie met gedetailleerde klinisch-pathologische en moleculaire gegevens en, indien beschikbaar, overeenkomstig PDX-materiaal mogelijk is. Als een laag-passage, van patiënten afkomstig colorectaal carcinoommodel is HROC222 T1 M2 geschikt voor onderzoek naar tumorbiologie, genotype-fenotype relaties en preklinische therapeutische tests binnen precisie-oncologisch onderzoek.
- Weefsel
- Dwarse dikke darm
- Ziekte
- Adenocarcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Niet van toepassing (primaire tumor in de transversale colon; T1 M2 verwijst naar het eerste chirurgische tijdstip, in-vitro-model 2)
- Toepassingen
- CRC-onderzoek; colorectaal adenocarcinoom; HROC Linnebacher-biobank; geneesmiddelgevoeligheid; tumorbiologie; integratie van PDX en in-vitro-onderzoek
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Man
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- Zonder genetisch gemodificeerde organismen
- Details over de GGO-status
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtig
- Celtype
- Epitheelcellen
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- HROC222 T1 M2 (Cytion catalogusnummer 300859)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VQ93
05Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- Om de 3 tot 5 dagen
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
07Donateur
- Leeftijd van de donor
- 79 jaar
- Etnische afkomst
- Kaukasisch
08Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er gelden overeenkomsten met derden
- Ja