HROC222 1. Dönem 2. Hafta

HROC222 T1 M2, yetişkin bir hastadan rezeke edilen primer tümörden HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) model koleksiyonu içinde oluşturulan bir insan kolorektal adenokarsinom hücre hattıdır. "T1" adı, numunenin ilk cerrahi aşamada alındığını, "M2" ise bu tümörden oluşturulan karşılık gelen in vitro modeli belirtir. HROC platformu, kapsamlı biyobankacılık, standartlaştırılmış moleküler anotasyon ve hasta kaynaklı ksenograftların (PDX) ve kalıcı düşük geçişli hücre hatlarının paralel olarak oluşturulmasını entegre ederek klinik olarak anotlanmış translasyonel araştırma modellerini mümkün kılar.

HROC222 T1 M2'nin oluşturulması, taze rezeke edilmiş tümör dokusunun mekanik olarak ayrıştırılması, tek hücreli süspansiyonların hazırlanması ve glutamin, antibiyotikler ve antimikotikler ile takviye edilmiş tanımlanmış tümör hücre kültürü ortamında kolajen kaplı kültür plakalarına ekilmesini içeren standart prosedürlere göre gerçekleştirilmiştir. HROC kohortunda, denenen numunelerin yaklaşık %13'ünden kalıcı birincil kolorektal kanser hücre hatları başarıyla oluşturulmuştur. İstatistiksel analiz, daha yüksek tümör derecelendirmesinin başarılı birincil hücre hattı oluşturulmasıyla önemli ölçüde ilişkili olduğunu belirlerken, ileri nodal durum olumlu bir eğilim göstermiştir. Koleksiyon genelinde yapılan çok değişkenli analizde, nodal tutulum model oluşturma başarısının bağımsız bir öngörücüsü olarak ortaya çıkmıştır.

HROC koleksiyonu, kromozomal instabilite (CIN), CpG ada metilatör fenotipi (CIMP), mikrosatellit stabil (MSS) ve mikrosatellit instabilitesi yüksek (MSI-H) tümörler dahil olmak üzere kolorektal karsinomun tüm önemli moleküler alt tiplerini ve KRAS, BRAF, TP53, APC ve PIK3CA gibi önemli sürücü genleri etkileyen çeşitli mutasyonel arka planları da içermektedir. HROC222 T1 M2, bu titizlikle karakterize edilmiş çerçeve içinde oluşturulmuş olup, ayrıntılı klinikopatolojik ve moleküler verilerle ve mevcut olduğu durumlarda ilgili PDX materyaliyle entegrasyona izin vermektedir. Düşük pasajlı, hastadan elde edilen kolorektal karsinom modeli olan HROC222 T1 M2, hassas onkoloji araştırmaları kapsamında tümör biyolojisi, genotip-fenotip ilişkileri ve preklinik terapötik testlerin araştırılması için uygundur.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın