Tartalomra ugrás
HROC222 T1 M2
Szövet
Keresztirányú vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (primer transzverzális vastagbél-daganat; a T1 M2 az első műtéti időpontot jelöli, 2. in vitro modell)

Dokumentumok

HROC222 T1 M2

Cell line · Termékszám 300859

A HROC222 T1 M2 egy humán kolorektális adenokarcinóma sejtvonal, amelyet a HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modellgyűjtemény keretében hoztak létre egy pr...

€800.00adó és szállítási költség nélkül
Rendelésre készül
1

01Általános információk

Leírás

A HROC222 T1 M2 egy humán kolorektális adenokarcinoma sejtvonal, amelyet a HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modellgyűjteményben hoztak létre egy felnőtt betegtől eltávolított primer tumorból. A „T1” jelölés azt jelzi, hogy a mintát az első műtéti időpontban vették, míg az „M2” jelölés a tumorból létrehozott megfelelő in vitro modellt jelöli. A HROC platform integrálja a átfogó biobankolást, a szabványosított molekuláris annotációt, valamint a betegektől származó xenotranszplantátumok (PDX) és állandó, alacsony passzálású sejtvonalak párhuzamos létrehozását, lehetővé téve a klinikailag annotált transzlációs kutatási modelleket.

A HROC222 T1 M2 létrehozása szabványosított eljárások szerint történt, amelyek magukban foglalták a frissen eltávolított tumor szövet mechanikus disszociációját, az egysejtes szuszpenziók előkészítését és a kollagénnel bevont tenyésztőlapokra való vetését glutaminnal, antibiotikumokkal és antimikotikumokkal kiegészített, meghatározott tumorsejt-tenyésztő tápközegben. A HROC kohortban az állandó elsődleges kolorektális rákos sejtvonalakat a megkísérelt minták körülbelül 13%-ából sikerült létrehozni. A statisztikai elemzés kimutatta, hogy a magasabb tumorosztályozás szignifikánsan összefügg a sikeres elsődleges sejtvonal létrehozásával, míg a fejlett nyirokcsomó-állapot pozitív tendenciát mutatott. A gyűjtemény egészére kiterjedő többváltozós elemzésben a nyirokcsomó-bevonódás a modell létrehozásának sikerét előrejelző független tényezőként jelent meg.

A HROC gyűjtemény a kolorektális karcinóma összes fő molekuláris altípusát magában foglalja, beleértve a kromoszómális instabilitást (CIN), a CpG-sziget metiláló fenotípust (CIMP), a mikroszatellit stabil (MSS) és a mikroszatellit instabilitás magas (MSI-H) tumorokat, valamint a kulcsfontosságú hajtó géneket, mint például a KRAS, BRAF, TP53, APC és PIK3CA. A HROC222 T1 M2-t ebben a szigorúan jellemzett keretrendszerben hozták létre, lehetővé téve a részletes klinikai-patológiai és molekuláris adatokkal, valamint – amennyiben rendelkezésre áll – a megfelelő PDX anyaggal való integrációt. Alacsony passzálású, betegektől származó kolorektális karcinóma modellként a HROC222 T1 M2 alkalmas a tumorbiológia, a genotípus-fenotípus kapcsolatok és a preklinikai terápiás vizsgálatok kutatására a precíziós onkológiai kutatások keretében.

Szövet
Keresztirányú vastagbél
Betegség
Adenokarcinóma
Áttétes hely
Nem alkalmazható (primer transzverzális vastagbél-daganat; a T1 M2 az első műtéti időpontot jelöli, 2. in vitro modell)
Alkalmazások
CRC-kutatás; kolorektális adenokarcinóma; HROC Linnebacher biobank; gyógyszerérzékenység; tumorbiológia; PDX–in vitro integráció

02Osztályozás

Organizmus
Ember
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-mentes
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű
Sejttípus
Epithel sejtek

04Azonosítók

Hivatkozás
HROC222 T1 M2 (Cytion katalógusszám: 300859)
NCBI adóazonosító szám
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
3-5 naponta
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Az adományozó életkora
79 év
Etnikai hovatartozás
Kaukázusi