- Szövet
- Keresztirányú vastagbél
- Betegség
- Adenokarcinóma
- Áttétes hely
- Nem alkalmazható (primer transzverzális vastagbél-daganat; a T1 M2 az első műtéti időpontot jelöli, 2. in vitro modell)
Dokumentumok
HROC222 T1 M2
Cell line · Termékszám 300859
A HROC222 T1 M2 egy humán kolorektális adenokarcinóma sejtvonal, amelyet a HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modellgyűjtemény keretében hoztak létre egy pr...
Személyre szabás / Ajánlások
- HROC222 T1 M2Cell line€800.00
01Általános információk
- Leírás
A HROC222 T1 M2 egy humán kolorektális adenokarcinoma sejtvonal, amelyet a HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) modellgyűjteményben hoztak létre egy felnőtt betegtől eltávolított primer tumorból. A „T1” jelölés azt jelzi, hogy a mintát az első műtéti időpontban vették, míg az „M2” jelölés a tumorból létrehozott megfelelő in vitro modellt jelöli. A HROC platform integrálja a átfogó biobankolást, a szabványosított molekuláris annotációt, valamint a betegektől származó xenotranszplantátumok (PDX) és állandó, alacsony passzálású sejtvonalak párhuzamos létrehozását, lehetővé téve a klinikailag annotált transzlációs kutatási modelleket.
A HROC222 T1 M2 létrehozása szabványosított eljárások szerint történt, amelyek magukban foglalták a frissen eltávolított tumor szövet mechanikus disszociációját, az egysejtes szuszpenziók előkészítését és a kollagénnel bevont tenyésztőlapokra való vetését glutaminnal, antibiotikumokkal és antimikotikumokkal kiegészített, meghatározott tumorsejt-tenyésztő tápközegben. A HROC kohortban az állandó elsődleges kolorektális rákos sejtvonalakat a megkísérelt minták körülbelül 13%-ából sikerült létrehozni. A statisztikai elemzés kimutatta, hogy a magasabb tumorosztályozás szignifikánsan összefügg a sikeres elsődleges sejtvonal létrehozásával, míg a fejlett nyirokcsomó-állapot pozitív tendenciát mutatott. A gyűjtemény egészére kiterjedő többváltozós elemzésben a nyirokcsomó-bevonódás a modell létrehozásának sikerét előrejelző független tényezőként jelent meg.
A HROC gyűjtemény a kolorektális karcinóma összes fő molekuláris altípusát magában foglalja, beleértve a kromoszómális instabilitást (CIN), a CpG-sziget metiláló fenotípust (CIMP), a mikroszatellit stabil (MSS) és a mikroszatellit instabilitás magas (MSI-H) tumorokat, valamint a kulcsfontosságú hajtó géneket, mint például a KRAS, BRAF, TP53, APC és PIK3CA. A HROC222 T1 M2-t ebben a szigorúan jellemzett keretrendszerben hozták létre, lehetővé téve a részletes klinikai-patológiai és molekuláris adatokkal, valamint – amennyiben rendelkezésre áll – a megfelelő PDX anyaggal való integrációt. Alacsony passzálású, betegektől származó kolorektális karcinóma modellként a HROC222 T1 M2 alkalmas a tumorbiológia, a genotípus-fenotípus kapcsolatok és a preklinikai terápiás vizsgálatok kutatására a precíziós onkológiai kutatások keretében.
- Szövet
- Keresztirányú vastagbél
- Betegség
- Adenokarcinóma
- Áttétes hely
- Nem alkalmazható (primer transzverzális vastagbél-daganat; a T1 M2 az első műtéti időpontot jelöli, 2. in vitro modell)
- Alkalmazások
- CRC-kutatás; kolorektális adenokarcinóma; HROC Linnebacher biobank; gyógyszerérzékenység; tumorbiológia; PDX–in vitro integráció
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Férfi
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-mentes
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű
- Sejttípus
- Epithel sejtek
04Azonosítók
- Hivatkozás
- HROC222 T1 M2 (Cytion katalógusszám: 300859)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VQ93
05Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Folyadékcsere
- 3-5 naponta
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
07Adományozó
- Az adományozó életkora
- 79 év
- Etnikai hovatartozás
- Kaukázusi
08Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen