- Tisu
- Usus besar melintang
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Lokasi metastasis
- Tidak berlaku (tumor kolon transversal primer; T1 M2 menunjukkan titik waktu bedah pertama, model in vitro 2)
Dokumen
HROC222 T1 M2
Cell line · Nomor produk 300859
HROC222 T1 M2 adalah garis sel adenokarsinoma kolorektal manusia yang dibudidayakan dalam koleksi model HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) dari sebuah pr...
Penyesuaian / Rekomendasi
- HROC222 T1 M2Cell line€800.00
01Informasi umum
- Deskripsi
HROC222 T1 M2 adalah garis sel adenokarsinoma kolorektal manusia yang didirikan dalam koleksi model HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) dari tumor primer yang diangkat dari pasien dewasa. Penomoran “T1” menunjukkan bahwa spesimen diperoleh pada waktu bedah pertama, sedangkan “M2” menandakan model in vitro yang dihasilkan dari tumor tersebut. Platform HROC mengintegrasikan biobanking komprehensif, anotasi molekuler standar, dan pembentukan paralel xenograft yang berasal dari pasien (PDX) serta garis sel permanen dengan jumlah passage rendah, memungkinkan model penelitian translasional yang dianotasi secara klinis.
Pembentukan HROC222 T1 M2 mengikuti prosedur standar yang melibatkan disosiasi mekanis jaringan tumor yang baru diangkat, persiapan suspensi sel tunggal, dan penanaman pada plate kultur yang dilapisi kolagen dalam medium kultur sel tumor yang didefinisikan, dilengkapi dengan glutamin, antibiotik, dan antijamur. Di seluruh kohort HROC, garis sel kanker kolorektal primer permanen berhasil dihasilkan dari sekitar 13% spesimen yang dicoba. Analisis statistik mengidentifikasi grading tumor yang lebih tinggi sebagai faktor yang secara signifikan terkait dengan keberhasilan pembentukan garis sel primer, sementara status nodal yang lebih lanjut menunjukkan tren positif. Dalam analisis multivariat di seluruh koleksi, keterlibatan nodal muncul sebagai prediktor independen keberhasilan pembentukan model.
Koleksi HROC mencakup semua subtipe molekuler utama karsinoma kolorektal, termasuk ketidakstabilan kromosom (CIN), fenotipe metilasi pulau CpG (CIMP), stabil mikrosatelit (MSS), dan tumor ketidakstabilan mikrosatelit tinggi (MSI-H), serta latar belakang mutasi yang beragam yang memengaruhi gen pengemudi kunci seperti KRAS, BRAF, TP53, APC, dan PIK3CA. HROC222 T1 M2 dihasilkan dalam kerangka kerja yang telah diteliti secara ketat ini, memungkinkan integrasi dengan data klinis-patologis dan molekuler yang rinci, serta material PDX yang sesuai jika tersedia. Sebagai model karsinoma kolorektal yang berasal dari pasien dengan jumlah passage rendah, HROC222 T1 M2 cocok untuk penelitian biologi tumor, hubungan genotipe-fenotipe, dan pengujian terapeutik praklinis dalam penelitian onkologi presisi.
- Tisu
- Usus besar melintang
- Penyakit
- Adenokarsinoma
- Lokasi metastasis
- Tidak berlaku (tumor kolon transversal primer; T1 M2 menunjukkan titik waktu bedah pertama, model in vitro 2)
- Aplikasi
- Penelitian CRC; adenokarsinoma kolorektal; biobank HROC Linnebacher; sensitivitas obat; biologi tumor; integrasi PDX-in vitro
02Klasifikasi
- Organisme
- Manusia
- Seks
- Laki-laki
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Status GMO
- Bebas Transgenik
- Rincian status GMO
- No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Seperti epitel
- Jenis sel
- Sel epitel
04Pengidentifikasi
- Referensi
- HROC222 T1 M2 (Nomor katalog Cytion 300859)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VQ93
05Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- DMEM: Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glukosa, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natrium piruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820400a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Tambahkan media dengan 10% FBS
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Pergantian cairan
- Setiap 3 hingga 5 hari
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
07Donatur
- Usia donor
- 79 tahun
- Etnis
- Kaukasia
08Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Berlaku ketentuan perjanjian pihak ketiga
- Ya