Prejsť na obsah
HROC222 T1 M2
Tkanivo
Priečne hrubé črevo
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Neplatí (primárny nádor priečneho hrubého čreva; T1 M2 označuje prvý chirurgický časový bod, in vitro model 2)

Dokumenty

HROC222 T1 M2

Cell line · Číslo výrobku 300859

HROC222 T1 M2 je ľudská bunková línia adenokarcinómu hrubého čreva a konečníka, ktorá bola vytvorená v rámci modelovej kolekcie HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) z pr...

€800.00bez DPH a poštovného
Na objednávku
1

01Všeobecné informácie

Popis

HROC222 T1 M2 je ľudská bunka adenokarcinómu hrubého čreva a konečníka, ktorá bola vytvorená v rámci modelovej kolekcie HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) z primárneho nádoru odstráneného z dospelého pacienta. Označenie „T1“ znamená, že vzorka bola odobratá pri prvom chirurgickom zákroku, zatiaľ čo „M2“ označuje zodpovedajúci in vitro model vytvorený z tohto nádoru. Platforma HROC integruje komplexné biobankovanie, štandardizované molekulárne anotácie a paralelné vytvorenie xenotransplantátov od pacientov (PDX) a trvalých bunkových línií s nízkym počtom pasáží, čo umožňuje klinicky anotované translačné výskumné modely.

Generovanie HROC222 T1 M2 prebiehalo podľa štandardizovaných postupov zahŕňajúcich mechanickú disociáciu čerstvo resekovaného nádorového tkaniva, prípravu suspenzií jednotlivých buniek a výsev na kultivačné platne potiahnuté kolagénom v definovanom kultivačnom médiu nádorových buniek doplnenom glutamínom, antibiotikami a antimykotikami. V rámci kohorty HROC sa podarilo vytvoriť trvalé primárne bunky kolorektálneho karcinómu z približne 13 % pokusných vzoriek. Štatistická analýza identifikovala vyššie stupňovanie nádoru ako významne asociované s úspešným vytvorením primárnych buniek, zatiaľ čo pokročilý uzlinový stav vykazoval pozitívny trend. V multivariačnej analýze celej kolekcie sa uzlinové postihnutie ukázalo ako nezávislý prediktor úspešnosti vytvorenia modelu.

Kolekcia HROC zahŕňa všetky hlavné molekulárne podtypy kolorektálneho karcinómu, vrátane chromozómovej nestability (CIN), fenotypu metylátora CpG ostrova (CIMP), mikrosatelitovej stability (MSS) a mikrosatelitovej nestability s vysokou hodnotou (MSI-H), ako aj rôznych mutačných pozadí ovplyvňujúcich kľúčové génové faktory, ako sú KRAS, BRAF, TP53, APC a PIK3CA. HROC222 T1 M2 bol vytvorený v rámci tohto prísne charakterizovaného rámca, čo umožňuje integráciu s podrobnými klinicko-patologickými a molekulárnymi údajmi a, ak sú k dispozícii, s príslušným PDX materiálom. Ako model kolorektálneho karcinómu s nízkym počtom pasáží, odvodený od pacienta, je HROC222 T1 M2 vhodný na výskum biológie nádorov, vzťahov medzi genotypom a fenotypom a na predklinické terapeutické testovanie v rámci presného onkologického výskumu.

Tkanivo
Priečne hrubé črevo
Choroba
Adenokarcinóm
Miesto metastáz
Neplatí (primárny nádor priečneho hrubého čreva; T1 M2 označuje prvý chirurgický časový bod, in vitro model 2)
Aplikácie
Výskum CRC; kolorektálny adenokarcinóm; biobanka HROC Linnebacher; citlivosť na lieky; biológia nádorov; integrácia PDX a in vitro

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
Bez GMO
Podrobnosti o štatúte GMO
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Typ bunky
Epitelové bunky

04Identifikátory

Citácia
HROC222 T1 M2 (katalógové číslo Cytion 300859)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Obnova kvapaliny
Každých 3 až 5 dní
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

07Darca

Vek darcu
79 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský