Gå direkt till innehållet
HROC222 T1 M2
Vävnad
Tvärgående kolon
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (primär tumör i tvärkolon; T1 M2 avser den första kirurgiska tidpunkten, in vitro-modell 2)

HROC222 T1 M2

Cell line · Produktnummer 300859

HROC222 T1 M2 är en cellinje från humant kolorektalt adenokarcinom som etablerats inom HROC-modellsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) från en pr...

€800.00exkl. moms och frakt
Tillverkas på beställning
1

01Allmän information

Beskrivning

HROC222 T1 M2 är en human kolorektal adenokarcinomcellinje som etablerats inom HROC-modellsamlingen (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) från en primärtumör som resekerats från en vuxen patient. Beteckningen ”T1” indikerar att provet erhölls vid den första kirurgiska tidpunkten, medan ”M2” betecknar motsvarande in vitro-modell som genererats från denna tumör. HROC-plattformen integrerar omfattande biobanking, standardiserad molekylär annotering och parallell etablering av patienthärledda xenotransplantat (PDX) och permanenta cellinjer med låg passage, vilket möjliggör kliniskt annoterade translationella forskningsmodeller.

Genereringen av HROC222 T1 M2 följde standardiserade procedurer som innefattade mekanisk dissociation av nyligen resekterad tumörvävnad, beredning av encellssuspensioner och utsäde på kollagenbelagda odlingsplattor i definierat tumörcellodlingsmedium kompletterat med glutamin, antibiotika och antimykotika. I HROC-kohorten etablerades permanenta primära kolorektalcancercellinjer framgångsrikt från cirka 13 % av de prov som testades. Statistisk analys identifierade högre tumörgradering som signifikant associerad med framgångsrik etablering av primära cellinjer, medan avancerad nodalstatus visade en positiv trend. I multivariat analys av hela samlingen framträdde nodal involvering som en oberoende prediktor för framgångsrik etablering av modellen.

HROC-samlingen omfattar alla viktiga molekylära subtyper av kolorektal cancer, inklusive kromosominstabilitet (CIN), CpG-ö-metylatorfenotyp (CIMP), mikrosatellitstabilitet (MSS) och mikrosatellitinstabilitet-hög (MSI-H) tumörer, samt olika mutationsbakgrunder som påverkar viktiga drivgener såsom KRAS, BRAF, TP53, APC och PIK3CA. HROC222 T1 M2 genererades inom denna rigoröst karakteriserade ram, vilket möjliggör integration med detaljerade klinisk-patologiska och molekylära data och, där så är möjligt, motsvarande PDX-material. Som en lågpassagerad, patienthärledd kolorektal karcinommodell är HROC222 T1 M2 lämplig för undersökningar av tumörbiologi, genotyp-fenotyp-relationer och prekliniska terapeutiska tester inom precisionsonkologisk forskning.

Vävnad
Tvärgående kolon
Sjukdom
Adenocarcinom
Metastaseringsställe
Ej tillämpligt (primär tumör i tvärkolon; T1 M2 avser den första kirurgiska tidpunkten, in vitro-modell 2)
Ansökningar
CRC-forskning; kolorektalt adenokarcinom; HROC Linnebacher-biobanken; läkemedelskänslighet; tumörbiologi; integration av PDX och in vitro-metoder

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
GMO-status
Utan genetiskt modifierade organismer
Detaljer om GMO-status
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande
Celltyp
Epiteliala celler

04Identifierare

Källa
HROC222 T1 M2 (Cytion katalognummer 300859)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukos, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
Var 3:e till 5:e dag
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
79 år
Etnicitet
Kaukasisk