Preskoči na vsebino
HROC222 T1 M2
Tkivo
Prečno debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Mesto metastaze
Ne velja (primarni tumor prečnega dela debelega črevesa; T1 M2 označuje prvi kirurški časovni točki, in vitro model 2)

Dokumenti

HROC222 T1 M2

Cell line · Številka izdelka 300859

HROC222 T1 M2 je človeška celična linija adenokarcinoma debelega črevesa, vzpostavljena v okviru zbirke modelov HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) iz vzorca...

€800.00brez davka in stroškov poštnine
Po naročilu
1

01Splošne informacije

Opis

HROC222 T1 M2 je človeška celična linija kolorektalnega adenokarcinoma, vzpostavljena v okviru zbirke modelov HROC (Hansestadt Rostock Colorectal Cancer) iz primarnega tumorja, odstranjenega pri odraslem pacientu. Oznaka „T1“ pomeni, da je bil vzorec pridobljen ob prvem kirurškem posegu, medtem ko „M2“ označuje ustrezen in vitro model, ustvarjen iz tega tumorja. Platforma HROC združuje celovito biobančno shranjevanje, standardizirano molekularno označevanje in vzporedno vzpostavljanje pacientovih ksenotransplantatov (PDX) in trajnih celičnih linij z nizkim številom prehodov, kar omogoča klinično označene translacijske raziskovalne modele.

Ustvarjanje HROC222 T1 M2 je potekalo po standardiziranih postopkih, ki vključujejo mehansko disociacijo sveže odstranjenega tumorja, pripravo suspenzij enoceličnih celic in sejanje na s kolagenom prevlečene kultivne plošče v definiranem kultivnem mediju za tumorske celice, dopolnjenem z glutaminom, antibiotiki in antimikotiki. V kohorti HROC so bile trajne primarne celične linije kolorektalnega raka uspešno vzpostavljene iz približno 13 % poskusnih vzorcev. Statistična analiza je pokazala, da je višja stopnja tumorja pomembno povezana z uspešno vzpostavitvijo primarne celične linije, medtem ko je napreden status bezgavk pokazal pozitiven trend. V multivariatni analizi zbirke se je vpletenost bezgavk izkazala kot neodvisni napovednik uspešnosti vzpostavitve modela.

Zbirka HROC zajema vse glavne molekularne podtipe kolorektalnega karcinoma, vključno s kromosomsko nestabilnostjo (CIN), fenotipom metilatorja CpG otoka (CIMP), mikrosatelitsko stabilnimi (MSS) in mikrosatelitsko nestabilnimi (MSI-H) tumorji, kot tudi različnimi mutacijskimi ozadji, ki vplivajo na ključne gonilne gene, kot so KRAS, BRAF, TP53, APC in PIK3CA. HROC222 T1 M2 je bil ustvarjen v tem strogo opredeljenem okviru, kar omogoča integracijo s podrobnimi kliničnopatološkimi in molekularnimi podatki ter, kjer je to mogoče, z ustreznim PDX materialom. Kot model kolorektalnega karcinoma z nizkim številom prehodov, pridobljen iz pacientov, je HROC222 T1 M2 primeren za raziskave tumorje

Tkivo
Prečno debelo črevo
Bolezen
Adenokarcinom
Mesto metastaze
Ne velja (primarni tumor prečnega dela debelega črevesa; T1 M2 označuje prvi kirurški časovni točki, in vitro model 2)
Uporaba
Raziskave na področju CRC; kolorektalni adenokarcinom; biobanka HROC Linnebacher; občutljivost na zdravila; biologija tumorja; integracija PDX-in vitro

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
Brez gensko spremenjenih organizmov
Podrobnosti o statusu GSO
No genetic modification; wildtype patient-derived CRC cell line (HROC Linnebacher biobank).
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni
Vrsta celice
Epitelijske celice

04Identifikatorji

Navajanje vira
HROC222 T1 M2 (kataloška številka Cytion 300859)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_VQ93

05Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Obnova tekočine
Vsakih 3 do 5 dni
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

07Donator

Starost darovalca
79 let
Etnična pripadnost
Kavkaški