HROC222 第1学期 第2週

HROC222 T1 M2は、成人患者から摘出された原発腫瘍から樹立されたヒト大腸腺癌細胞株であり、HROC（ハンザ都市ロストック大腸癌）モデルコレクションに収蔵されている。 「T1」の名称は、標本が初回手術時点で採取されたことを示し、「M2」は当該腫瘍から作成された対応するin vitroモデルを意味する。HROCプラットフォームは、包括的なバイオバンキング、標準化された分子アノテーション、患者由来異種移植モデル（PDX）と恒久的な低継代細胞株の並行確立を統合し、臨床的にアノテーションされたトランスレーショナル研究モデルを実現する。

HROC222 T1 M2の生成には、機械的解離による新鮮切除腫瘍組織の処理、単一細胞懸濁液の調製、グルタミン・抗生物質・抗真菌剤添加の定義済み腫瘍細胞培養培地を用いたコラーゲン被覆培養プレートへの播種を含む標準化手順が適用された。 HROCコホート全体において、試行検体の約13%から恒久的な一次大腸癌細胞株の樹立に成功した。統計解析により、腫瘍分化度が高いほど一次細胞株樹立の成功率と有意に関連し、進行したリンパ節転移状態は正の傾向を示した。コレクション全体の多変量解析では、リンパ節転移がモデル樹立成功の独立した予測因子として浮上した。

HROCコレクションは、染色体不安定性（CIN）、CpGアイランドメチル化表現型（CIMP）、マイクロサテライト安定型（MSS）、マイクロサテライト不安定性高（MSI-H）腫瘍を含む大腸癌の主要な分子サブタイプ全てを網羅している。さらに、KRAS、 BRAF、TP53、APC、PIK3CAなどの主要ドライバー遺伝子に影響を与える多様な変異背景を含む。 HROC222 T1 M2は、この厳密に特徴づけられた枠組みの中で生成され、詳細な臨床病理学的および分子データ、そして入手可能な場合には対応するPDX材料との統合を可能にしています。低継代数の患者由来大腸癌モデルであるHROC222 T1 M2は、腫瘍生物学、遺伝子型と表現型の関係、および精密腫瘍学研究における前臨床治療試験の調査に適しています。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。