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A673
Tissu
Os
Maladie
Sarcome d'Ewing
Synonymes
A-673, RMS 1598, RMS1598

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A673

Cell line · Référence du produit 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00hors taxes et frais de port
En stock
Lot
Recommandé (lot le plus récent)
1

01Informations générales

Description

La lignée cellulaire A673 est une ressource précieuse pour la science biologique. Dérivée du tissu musculaire d'une patiente de 15 ans atteinte d'un sarcome d'Ewings, cette lignée cellulaire présente une morphologie polygonale distincte. À l'origine, on pensait que cette lignée cellulaire était dérivée d'un rhabdomyosarcome (RMS).

L'une des caractéristiques remarquables des cellules A673 est leur capacité à produire plusieurs facteurs de croissance qui possèdent un potentiel oncogène. Ces cellules sécrètent également des facteurs inhibiteurs de croissance, offrant ainsi un environnement équilibré pour la régulation de la croissance cellulaire. Ces propriétés font des cellules A673 un excellent modèle pour étudier l'interaction entre les facteurs de promotion et de suppression des tumeurs. Les cellules A673 ont démontré leur potentiel tumorigène, puisqu'elles peuvent induire la formation de tumeurs chez des souris immunodéprimées.

En outre, des études ont identifié des promoteurs hyperméthylés dans des gènes liés au cancer au sein de la lignée cellulaire A673. Ces altérations génétiques renforcent l'intérêt de cette lignée pour la recherche sur le cancer, en offrant une plateforme pour explorer les modifications épigénétiques et leur impact sur le développement et la progression des tumeurs.

Les cellules A673 sont souvent appelées tumeur d'Ewing (ET) ou sarcome (ES), mais elles sont également associées au rhabdomyosarcome (RMS). La lignée cellulaire A673 présente notamment un caryotype complexe avec une translocation spécifique impliquant les chromosomes 11 et 22. Cette translocation entraîne la fusion des gènes EWS et FLI1, ce qui est un événement génétique caractéristique de la tumeur d'Ewing.

Tissu
Os
Maladie
Sarcome d'Ewing
Synonymes
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Classification

Organisme
Humain
Sexe
Femme
Propriétés de croissance
Adepte
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
De type fibroblastique
Tumorigène
Oui, chez les souris immunodéprimées
Temps de doublement
28 heures

04Identifiants

Référence
A673 (numéro de catalogue Cytion 300454)
Numéro d'identification fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Expression et sensibilité

Sensibilité aux virus
Très sensible aux adénovirus humains

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM, w : 4.5 g/L Glucose, w : 4 mM L-Glutamine, w : 3.7 g/L NaHCO3, w : 1.0 mM Pyruvate de sodium (numéro d'article Cytion 820300a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10% de FBS
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Densité de semis
1 x 104 cellules/cm2 donnera lieu à une monocouche confluente en 8 jours.
Renouvellement des fluides
2 à 3 fois par semaine
Récupération après le dégel
Après décongélation, ensemencer les cellules à raison de 5 x 104 cellules/cm2 et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Âge du donneur
15 ans
Origine ethnique
Caucasien