A673

A linhagem celular A673 é um recurso valioso na ciência biológica. Derivada do tecido muscular de uma paciente de 15 anos diagnosticada com sarcoma de Ewing, essa linhagem celular apresenta uma morfologia poligonal distinta. Inicialmente, acreditava-se que a linhagem celular fosse derivada de um rabdomiossarcoma (RMS).

Uma das características notáveis das células A673 é sua capacidade de produzir diversos fatores de crescimento que possuem potencial oncogênico. Essas células também secretam fatores inibidores de crescimento, proporcionando um ambiente equilibrado para a regulação do crescimento celular. Tais propriedades tornam as células A673 um excelente modelo para investigar a interação entre fatores promotores e supressores de tumores. As células A673 demonstraram potencial tumorigênico, pois podem induzir a formação de tumores em camundongos imunossuprimidos.

Além disso, estudos identificaram promotores hipermetilados em genes relacionados ao câncer na linhagem celular A673. Essas alterações genéticas contribuem ainda mais para sua relevância na pesquisa do câncer, oferecendo uma plataforma para explorar modificações epigenéticas e seu impacto no desenvolvimento e na progressão do tumor.

Embora as células A673 sejam frequentemente referidas como tumor de Ewing (ET) ou sarcoma de Ewing (ES), elas também estão associadas ao rabdomiossarcoma (RMS). Notavelmente, a linhagem celular A673 apresenta um cariótipo complexo com uma translocação específica envolvendo os cromossomos 11 e 22. Essa translocação leva à fusão dos genes EWS e FLI1, o que é um evento genético característico do tumor de Ewing.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.