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A673
Pañuelo de papel
Hueso
Enfermedad
Sarcoma de Ewing
Sinónimos
A-673, RMS 1598, RMS1598

Documentos

A673

Cell line · Número de producto 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

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01Información general

Descripción

La línea celular A673 es un valioso recurso para la ciencia biológica. Derivada del tejido muscular de una paciente de 15 años diagnosticada de sarcoma de Ewings, esta línea celular presenta una morfología poligonal distintiva. Originalmente se pensó que la línea celular derivaba de un rabdomiosarcoma (RMS).

Una de las características destacables de las células A673 es su capacidad para producir varios factores de crecimiento que poseen potencial oncogénico. Estas células también secretan factores inhibidores del crecimiento, lo que proporciona un entorno equilibrado para la regulación del crecimiento celular. Estas propiedades hacen de las células A673 un modelo excelente para investigar la interacción entre factores promotores y supresores de tumores. Las células A673 han demostrado su potencial tumorigénico, ya que pueden inducir la formación de tumores en ratones inmunodeprimidos.

Además, los estudios han identificado promotores hipermetilados en genes relacionados con el cáncer dentro de la línea celular A673. Estas alteraciones genéticas contribuyen aún más a su relevancia en la investigación del cáncer, ya que ofrecen una plataforma para explorar las modificaciones epigenéticas y su impacto en el desarrollo y la progresión tumoral.

Aunque las células A673 suelen denominarse tumor de Ewing (TE) o sarcoma (ES), también se asocian con el rabdomiosarcoma (RMS). En particular, la línea celular A673 presenta un cariotipo complejo con una translocación específica que afecta a los cromosomas 11 y 22. Esta translocación conduce a la fusión de los cromosomas 11 y 22 en un cromosoma. Esta translocación conduce a la fusión de los genes EWS y FLI1, que es un evento genético característico del tumor de Ewing.

Pañuelo de papel
Hueso
Enfermedad
Sarcoma de Ewing
Sinónimos
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Mujer
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Tipo fibroblasto
Tumorigénico
Sí, en ratones inmunodeprimidos
Tiempo de duplicación
28 horas

04Identificadores

Referencia
A673 (número de catálogo 300454 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Expresión y susceptibilidad

Susceptibilidad a los virus
Alta sensibilidad a los adenovirus humanos

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2 dará lugar a una monocapa confluente en un plazo de 8 días.
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Después de descongelar, siembre las células a 5 x 104 células/cm2 y deje que las células se recuperen del proceso de congelación y se adhieran durante al menos 24 horas.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
15 años
Origen étnico
Caucásico