Skip to content
A673
Tissue
กระดูก
Disease
ซาร์โคมาของยูวิง
Synonyms
A-673, RMS 1598, RMS1598

Documents

A673

Cell line · Product number 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ไลน์ A673 เป็นทรัพยากรที่มีคุณค่าในวิทยาศาสตร์ชีวภาพ มีต้นกำเนิดจากเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อของผู้ป่วยหญิงอายุ 15 ปีที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นมะเร็งเอวิงส์ซาร์โคมา เซลล์ไลน์นี้แสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่เป็นรูปหลายเหลี่ยมอย่างชัดเจน เดิมทีเซลล์ไลน์นี้ถูกคิดว่าเป็นเซลล์ที่มาจากมะเร็งกล้ามเนื้อลายชนิดเรบโดไมโอซาร์โคมา (RMS)

หนึ่งในลักษณะที่โดดเด่นของเซลล์ A673 คือความสามารถในการผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตหลายชนิดที่มีศักยภาพในการก่อให้เกิดมะเร็ง เซลล์เหล่านี้ยังหลั่งปัจจัยที่ยับยั้งการเจริญเติบโต ซึ่งช่วยสร้างสภาพแวดล้อมที่สมดุลสำหรับการควบคุมการเจริญเติบโตของเซลล์ คุณสมบัติเหล่านี้ทำให้เซลล์ A673 เป็นแบบจำลองที่ยอดเยี่ยมสำหรับการศึกษาปฏิสัมพันธ์ระหว่างปัจจัยที่ส่งเสริมและยับยั้งการเกิดเนื้องอกมะเร็งเซลล์ A673 ได้แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการก่อให้เกิดเนื้องอก เนื่องจากสามารถกระตุ้นการเกิดเนื้องอกในหนูที่ถูกกดภูมิคุ้มกันได้

นอกจากนี้ การศึกษาได้ระบุตัวส่งเสริมการเกิดเมทิลเลชันสูงในยีนที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งภายในสายเซลล์ A673 การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมเหล่านี้มีส่วนช่วยเพิ่มความสำคัญในการวิจัยมะเร็ง โดยเป็นแพลตฟอร์มในการสำรวจการเปลี่ยนแปลงทางอีพิเจเนติกและผลกระทบต่อการพัฒนาและการลุกลามของเนื้องอก

แม้ว่าเซลล์ A673 มักถูกเรียกว่าเนื้องอกอีวิง (ET) หรือซาร์โคมา (ES) แต่พวกมันยังมีความเกี่ยวข้องกับแรบโดไมโอซาร์โคมา (RMS) อีกด้วยที่น่าสังเกตคือ สายเซลล์ A673 มีโครโมโซมแบบคาริโอไทป์ที่ซับซ้อนซึ่งมีการสลับตำแหน่งเฉพาะระหว่างโครโมโซมคู่ที่ 11 และ 22 การสลับตำแหน่งนี้ส่งผลให้เกิดการหลอมรวมของยีน EWS และ FLI1 ซึ่งเป็นเหตุการณ์ทางพันธุกรรมที่เป็นลักษณะเฉพาะของเนื้องอกอีวิง

Tissue
กระดูก
Disease
ซาร์โคมาของยูวิง
Synonyms
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
คล้ายไฟโบรบลาสต์
Tumourigenic
ใช่ ในหนูที่มีภาวะภูมิคุ้มกันบกพร่อง
Doubling time
28 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
A673 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
ไวต่ออะดีโนไวรัสในมนุษย์อย่างมาก

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 4 มิลลิโมลาร์ แอล-กลูตามีน, w: 3.7 กรัม/ลิตร NaHCO3, w: 1.0 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต (หมายเลขบทความ Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 104 เซลล์/cm2 จะทำให้เกิดชั้นเดียวที่หนาแน่นภายใน 8 วัน
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
15 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน