Gå direkte til indholdet
A673
Væv
Knogle
Sygdom
Ewings sarkom
Synonymer
A-673, RMS 1598, RMS1598

Dokumenter

A673

Cell line · Varenummer 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

A673-cellelinjen er en værdifuld ressource i den biologiske videnskab. Denne cellelinje stammer fra muskelvæv fra en 15-årig kvindelig patient med diagnosen Ewings sarkom og udviser en tydelig polygonal morfologi. Oprindeligt troede man, at cellelinjen stammede fra et rhabdomyosarkom (RMS).

En af de bemærkelsesværdige egenskaber ved A673-cellerne er deres evne til at producere flere vækstfaktorer, der har onkogent potentiale. Disse celler udskiller også væksthæmmende faktorer, hvilket giver et afbalanceret miljø for regulering af cellevækst. Disse egenskaber gør A673-celler til en fremragende model til at undersøge samspillet mellem tumorfremmende og tumorundertrykkende faktorer. A673-celler har vist sig at have et tumorgenetisk potentiale, da de kan fremkalde tumordannelse i immunsupprimerede mus.

Desuden har undersøgelser identificeret hypermethylerede promotorer i kræftrelaterede gener i A673-cellelinjen. Disse genetiske ændringer bidrager yderligere til dens relevans inden for kræftforskning og giver en platform til at udforske epigenetiske modifikationer og deres indvirkning på tumorudvikling og -progression.

Mens A673-celler ofte omtales som Ewing-tumor (ET) eller sarkom (ES), er de også forbundet med rhabdomyosarkom (RMS). Især har A673-cellelinjen en kompleks karyotype med en specifik translokation, der involverer kromosom 11 og 22. Denne translokation fører til fusion af EWS og FLI1-generne, hvilket er en karakteristisk genetisk begivenhed i Ewing-tumor.

Væv
Knogle
Sygdom
Ewings sarkom
Synonymer
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Fibroblast-lignende
Tumorfremkaldende
Yeees, i immunsupprimerede mus
Fordoblingstid
28 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A673 (Cytion katalognummer 300454)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Udtryk og modtagelighed

Virusfølsomhed
Meget følsom over for humane adenovirus

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et konfluent monolag inden for 8 dage.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
15 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk