Gå direkt till innehållet
A673
Vävnad
Ben
Sjukdom
Ewings sarkom
Synonymer
A-673, RMS 1598, RMS1598

A673

Cell line · Produktnummer 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

Cellinjen A673 är en värdefull resurs inom biologisk vetenskap. Cellinjen härrör från muskelvävnaden hos en 15-årig kvinnlig patient som diagnostiserats med Ewings sarkom och uppvisar en distinkt polygonal morfologi. Ursprungligen trodde man att cellinjen härrörde från ett rabdomyosarkom (RMS).

En av de anmärkningsvärda egenskaperna hos A673-cellerna är deras förmåga att producera flera tillväxtfaktorer som har onkogen potential. Dessa celler utsöndrar också tillväxthämmande faktorer, vilket ger en balanserad miljö för reglering av celltillväxt. Dessa egenskaper gör A673-cellerna till en utmärkt modell för att undersöka samspelet mellan tumörfrämjande och tumörhämmande faktorer. A673-celler har visat sig ha tumörframkallande potential, eftersom de kan framkalla tumörbildning i immunsupprimerade möss.

Dessutom har studier identifierat hypermetylerade promotorer i cancerrelaterade gener inom A673-cellinjen. Dessa genetiska förändringar bidrar ytterligare till dess relevans inom cancerforskningen och erbjuder en plattform för att utforska epigenetiska modifieringar och deras inverkan på tumörutveckling och progression.

A673-cellerna kallas ofta Ewing-tumör (ET) eller sarkom (ES), men de förknippas också med rhabdomyosarkom (RMS). A673-cellinjen har en komplex karyotyp med en specifik translokation som involverar kromosomerna 11 och 22. Denna translokation leder till fusion av generna EWS och FLI1, vilket är en karakteristisk genetisk händelse vid Ewing Tumor.

Vävnad
Ben
Sjukdom
Ewings sarkom
Synonymer
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastliknande
Tumörframkallande
Ja, i immunsupprimerade möss
Fördubblingstid
28 timmar

04Identifierare

Källa
A673 (Cytion katalognummer 300454)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Uttryck och mottaglighet

Virusmottaglighet
Mycket känslig för humana adenovirus

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
1 x 104 celler/cm2 resulterar i ett konfluent monolager inom 8 dagar.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Donatorns ålder
15 år
Etnicitet
Kaukasisk