Gå til innholdet
A673
Vev
Bein
Sykdom
Ewings sarkom
Synonymer
A-673, RMS 1598, RMS1598

Dokumenter

A673

Cell line · Produktnummer 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

A673-cellelinjen er en verdifull ressurs innen biologisk forskning. Cellelinjen stammer fra muskelvev fra en 15 år gammel kvinnelig pasient som ble diagnostisert med Ewings sarkom, og den har en utpreget polygonal morfologi. Opprinnelig trodde man at cellelinjen stammet fra et rabdomyosarkom (RMS).

Et av de bemerkelsesverdige kjennetegnene ved A673-cellene er deres evne til å produsere flere vekstfaktorer som har onkogent potensial. Disse cellene skiller også ut veksthemmende faktorer, noe som gir et balansert miljø for regulering av cellevekst. Disse egenskapene gjør A673-celler til en utmerket modell for å undersøke samspillet mellom tumorfremmende og tumorsupprimerende faktorer. A673-celler har vist seg å ha et tumorogent potensial, ettersom de kan indusere tumordannelse i immunsupprimerte mus.

Studier har dessuten identifisert hypermetylerte promotorer i kreftrelaterte gener i A673-cellelinjen. Disse genetiske endringene bidrar ytterligere til cellelinjens relevans i kreftforskningen, og gir en plattform for å utforske epigenetiske modifikasjoner og deres innvirkning på utvikling og progresjon av svulster.

A673-celler omtales ofte som Ewing-svulst (ET) eller sarkom (ES), men de forbindes også med rabdomyosarkom (RMS). A673-cellelinjen har en kompleks karyotype med en spesifikk translokasjon som involverer kromosom 11 og 22. Denne translokasjonen fører til fusjon av AWS- og FLI1-genene, noe som er en karakteristisk genetisk hendelse ved Ewing-tumor.

Vev
Bein
Sykdom
Ewings sarkom
Synonymer
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Fibroblastlignende
Tumorinduserende
Ja, i immunsupprimerte mus
Fordoblingstid
28 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A673 (Cytion-katalognummer 300454)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Uttrykk og mottakelighet

Virusfølsomhet
Svært følsom overfor humane adenovirus

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
1 x 104 celler/cm2 vil resultere i et sammenvokst monolag innen 8 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
15 år
Etnisitet
Kaukasisk