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A673
ティッシュ
骨
病気
ユーイング肉腫
同義語
A-673, RMS 1598, RMS1598

A673

Cell line · 製品番号 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

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01概要

説明

A673細胞株は、生物科学における貴重な資源である。もともとこの細胞株は横紋筋肉腫(RMS)に由来すると考えられていた。

A673細胞の顕著な特徴の一つは、がん化能を有するいくつかの成長因子を産生する能力である。これらの細胞は成長抑制因子も分泌し、細胞の成長調節にバランスのとれた環境を提供している。このような特性により、A673細胞は腫瘍促進因子と腫瘍抑制因子の相互作用を研究するための優れたモデルとなっている。A673細胞は免疫抑制マウスにおいて腫瘍形成を誘導することができるため、腫瘍形成能を示す。

さらに、研究ではA673細胞株内の癌関連遺伝子のプロモーターが過剰にメチル化されていることが同定されている。このような遺伝子変化は、エピジェネティックな修飾と腫瘍の発生と進行に対するその影響を研究するプラットフォームを提供し、癌研究におけるA673細胞株の関連性をさらに高めている。

A673細胞はしばしばユーイング腫瘍(ET)または肉腫(ES)と呼ばれるが、横紋筋肉腫(RMS)とも関連している。注目すべきことに、A673細胞株は11番と22番の染色体に特異的な転座を伴う複雑な核型を有している。この転座はEWS遺伝子とFLI1遺伝子の融合につながり、ユーイング腫瘍に特徴的な遺伝的事象である。

ティッシュ
骨
病気
ユーイング肉腫
同義語
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞様
腫瘍形成性
はい、免疫抑制マウスにおいて
倍増時間
28時間

04識別子

引用
A673(Cytion カタログ番号 300454)
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
CVCL_0080

05発現と感受性

ウイルス感受性
ヒトアデノウイルスに高感度

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
10⁴細胞/cm²の密度で播種すると、8日以内に密接な単層が形成される。
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
15年
民族
白人