Przejdź do treści
A673
Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak Ewinga
Synonimy
A-673, RMS 1598, RMS1598

Dokumenty

A673

Cell line · Numer produktu 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa A673 jest cennym zasobem w naukach biologicznych. Pochodząca z tkanki mięśniowej 15-letniej pacjentki ze zdiagnozowanym mięsakiem Ewinga, ta linia komórkowa wykazuje wyraźną wielokątną morfologię. Pierwotnie uważano, że linia komórkowa pochodzi z mięsaka prążkowanokomórkowego (RMS).

Jedną z niezwykłych cech komórek A673 jest ich zdolność do wytwarzania kilku czynników wzrostu, które posiadają potencjał onkogenny. Komórki te wydzielają również czynniki hamujące wzrost, zapewniając zrównoważone środowisko do regulacji wzrostu komórkowego. Takie właściwości sprawiają, że komórki A673 są doskonałym modelem do badania interakcji między czynnikami promującymi i hamującymi rozwój nowotworu. Komórki A673 wykazały potencjał nowotworowy, ponieważ mogą indukować powstawanie guzów u myszy poddanych immunosupresji.

Co więcej, w badaniach zidentyfikowano hipermetylowane promotory genów związanych z rakiem w linii komórkowej A673. Te zmiany genetyczne dodatkowo przyczyniają się do jej znaczenia w badaniach nad rakiem, oferując platformę do badania modyfikacji epigenetycznych i ich wpływu na rozwój i progresję nowotworu.

Podczas gdy komórki A673 są często określane jako guz Ewinga (ET) lub mięsak (ES), są one również związane z mięsakiem prążkowanokomórkowym (RMS). Warto zauważyć, że linia komórkowa A673 ma złożony kariotyp ze specyficzną translokacją obejmującą chromosomy 11 i 22. Ta translokacja prowadzi do fuzji genów EWS i FLI1, co jest charakterystycznym zdarzeniem genetycznym w guzie Ewinga.

Chusteczka
Kość
Choroba
Mięsak Ewinga
Synonimy
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Kobieta
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do fibroblastów
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy z obniżoną odpornością
Czas podwojenia
28 godzin

04Identyfikatory

Źródło
A673 (numer katalogowy Cytion 300454)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Ekspresja i podatność

Podatność na wirusy
Wysoka wrażliwość na ludzkie adenowirusy

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 x 104 komórek/cm2 spowoduje powstanie zlewającej się monowarstwy w ciągu 8 dni.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Powrót do stanu sprzed rozmrożenia
Po rozmrożeniu umieść komórki na płytce w ilości 5 x 104 komórek/cm2 i pozostaw je na co najmniej 24 godziny, aby mogły się zregenerować po procesie zamrażania i przylgnąć do podłoża.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
15 lat
Pochodzenie etniczne
Kaukaski