Preskoči na vsebino
A673
Tkivo
Kosti
Bolezen
Ewingov sarkom
Sinonimi
A-673, RMS 1598, RMS1598

Dokumenti

A673

Cell line · Številka izdelka 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija A673 je dragocen vir v biološki znanosti. Ta celična linija, pridobljena iz mišičnega tkiva 15-letne bolnice z diagnozo sarkoma Ewings, ima izrazito poligonalno morfologijo. Prvotno so domnevali, da celična linija izhaja iz rabdomiosarkoma (RMS).

Ena od izjemnih značilnosti celic A673 je njihova sposobnost proizvajanja več rastnih dejavnikov, ki imajo onkogeni potencial. Te celice izločajo tudi dejavnike, ki zavirajo rast, kar zagotavlja uravnoteženo okolje za uravnavanje celične rasti. Zaradi teh lastnosti so celice A673 odličen model za preučevanje medsebojnega vpliva med dejavniki, ki spodbujajo in zavirajo nastanek tumorja. Celice A673 so pokazale tumorigen potencial, saj lahko povzročijo nastanek tumorjev pri imunosuprimiranih miših.

Poleg tega so v študijah ugotovili hipermetilirane promotorje genov, povezanih z rakom, v celični liniji A673. Te genetske spremembe dodatno prispevajo k njenemu pomenu pri raziskavah raka, saj ponujajo platformo za raziskovanje epigenetskih sprememb in njihovega vpliva na razvoj in napredovanje tumorjev.

Čeprav se celice A673 pogosto imenujejo Ewingov tumor (ET) ali sarkom (ES), jih povezujejo tudi z rabdomiosarkomom (RMS). Celica linije A673 ima kompleksen kariotip s posebno translokacijo, ki vključuje kromosoma 11 in 22. Ta translokacija povzroči združitev genov EWS in FLI1, kar je značilen genetski dogodek pri Ewingovem tumorju.

Tkivo
Kosti
Bolezen
Ewingov sarkom
Sinonimi
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Razvrstitev

Organizem
Človek
Seks
Ženska
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Fibroblastom podobni
Tumorigeničen
Da, pri imunosuprimiranih miših
Čas podvojitve
28 ur

04Identifikatorji

Navajanje vira
A673 (kataloška številka Cytion 300454)
Davčna identifikacijska številka NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Izražanje in dovzetnost

Občutljivost na virus
Visoka občutljivost na človeške adenoviruse

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
1 x 104 celic/cm2 bo v 8 dneh povzročilo konfluentno monosloj.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Starost darovalca
15 let
Etnična pripadnost
Kavkaški