İçeriğe atla
A673
Doku
Kemik
Hastalık
Ewing Sarkomu
Eş anlamlılar
A-673, RMS 1598, RMS1598

A673

Cell line · Ürün numarası 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
1

01Genel bilgiler

Açıklama

A673 hücre hattı biyoloji biliminde değerli bir kaynaktır. Ewings Sarkomu teşhisi konan 15 yaşındaki bir kadın hastanın kas dokusundan elde edilen bu hücre hattı, belirgin bir poligonal morfoloji sergilemektedir. Başlangıçta hücre hattının bir rabdomyosarkomdan (RMS) türetildiği düşünülmüştür.

A673 hücrelerinin dikkat çekici özelliklerinden biri, onkojenik potansiyele sahip çeşitli büyüme faktörleri üretebilmeleridir. Bu hücreler aynı zamanda büyümeyi engelleyici faktörler de salgılayarak hücresel büyümenin düzenlenmesi için dengeli bir ortam sağlar. Bu özellikler A673 hücrelerini tümörü teşvik eden ve tümörü baskılayan faktörler arasındaki etkileşimi araştırmak için mükemmel bir model haline getirmektedir. A673 hücreleri, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde tümör oluşumunu indükleyebildikleri için tümörijenik potansiyel göstermiştir.

Dahası, çalışmalar A673 hücre hattında kanserle ilişkili genlerde hipermetillenmiş promotörler tespit etmiştir. Bu genetik değişiklikler, epigenetik modifikasyonları ve bunların tümör gelişimi ve ilerlemesi üzerindeki etkilerini keşfetmek için bir platform sunarak kanser araştırmalarındaki önemine daha da katkıda bulunur.

A673 hücreleri genellikle Ewing tümörü (ET) veya sarkom (ES) olarak adlandırılırken, rabdomiyosarkom (RMS) ile de ilişkilendirilmektedir. Özellikle A673 hücre hattı, 11 ve 22. kromozomları içeren spesifik bir translokasyona sahip karmaşık bir karyotip barındırmaktadır. Bu translokasyon, Ewing Tümöründe karakteristik bir genetik olay olan EWS ve FLI1 genlerinin füzyonuna yol açar.

Doku
Kemik
Hastalık
Ewing Sarkomu
Eş anlamlılar
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Kadın
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast benzeri
Tümör oluşturucu
Evet, bağışıklık sistemi baskılanmış farelerde
İki katına çıkma süresi
28 saat

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A673 (Cytion katalog numarası 300454)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05İfade ve duyarlılık

Virüse karşı duyarlılık
İnsan adenovirüslerine karşı son derece hassas

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM, w: 4,5 g/L Glukoz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Sodyum piruvat (Cytion ürün numarası 820300a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
1 x 104 hücre/cm2, 8 gün içinde birleşik tek tabaka oluşturacaktır.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözülme sonrası toparlanma
Çözüldükten sonra, hücreleri 5 x 104 hücre/cm2 olarak plakaya yerleştirin ve hücrelerin dondurma işleminden kurtulmasını ve en az 24 saat boyunca yapışmasını bekleyin.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
15 yıl
Etnik köken
Kafkas