Langsung ke isi
A673
Tisu
Tulang
Penyakit
Sarkoma Ewing
Sinonim
A-673, RMS 1598, RMS1598

A673

Cell line · Nomor produk 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel A673 adalah sumber daya yang berharga dalam ilmu biologi. Berasal dari jaringan otot pasien wanita berusia 15 tahun yang didiagnosis dengan Sarkoma Ewings, lini sel ini menunjukkan morfologi poligonal yang berbeda. Awalnya, lini sel ini dianggap berasal dari rhabdomyosarcoma (RMS).

Salah satu karakteristik luar biasa dari sel A673 adalah kemampuannya untuk menghasilkan beberapa faktor pertumbuhan yang memiliki potensi onkogenik. Sel-sel ini juga mengeluarkan faktor penghambat pertumbuhan, menyediakan lingkungan yang seimbang untuk regulasi pertumbuhan sel. Sifat-sifat tersebut membuat sel A673 menjadi model yang sangat baik untuk menyelidiki interaksi antara faktor pemicu tumor dan penekan tumor. Sel A673 telah menunjukkan potensi tumorigenik, karena dapat menginduksi pembentukan tumor pada tikus yang mengalami penekanan imun.

Selain itu, penelitian telah mengidentifikasi promotor hipermetilasi pada gen yang berhubungan dengan kanker di dalam garis sel A673. Perubahan genetik ini lebih lanjut berkontribusi pada relevansinya dalam penelitian kanker, menawarkan platform untuk mengeksplorasi modifikasi epigenetik dan dampaknya terhadap perkembangan dan perkembangan tumor.

Meskipun sel A673 sering disebut sebagai tumor Ewing (ET) atau sarkoma (ES), sel ini juga dikaitkan dengan rhabdomyosarcoma (RMS). Secara khusus, garis sel A673 memiliki kariotipe yang kompleks dengan translokasi spesifik yang melibatkan kromosom 11 dan 22. Translokasi ini mengarah pada perpaduan gen EWS dan FLI1, yang merupakan peristiwa genetik yang khas pada Ewing Tumor.

Tisu
Tulang
Penyakit
Sarkoma Ewing
Sinonim
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Seperti fibroblast
Tumorigenik
Ya, pada tikus yang mengalami imunosupresi
Waktu penggandaan
28 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
A673 (Nomor katalog Cytion 300454)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Ekspresi dan kerentanan

Kerentanan terhadap virus
Sangat sensitif terhadap adenovirus manusia

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Kepadatan penanaman
1 x 10⁴ sel/cm² akan menghasilkan lapisan tunggal yang padat dalam waktu 8 hari.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pemulihan pasca-pencairan
Setelah dicairkan, tanam sel pada kepadatan 5 x 10⁴ sel/cm² dan biarkan sel pulih dari proses pembekuan serta menempel setidaknya selama 24 jam.
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
15 tahun
Etnis
Kaukasia