A673
Cell line · Tuotenumero 300454
The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...
Räätälöinti / Suositukset
- A673Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
A673-solulinja on arvokas resurssi biologisessa tieteessä. Tämä solulinja on peräisin 15-vuotiaan naispotilaan lihaskudoksesta, jolla oli Ewingsin sarkooma, ja sillä on selkeä monikulmainen morfologia. Alun perin solulinjan luultiin olevan peräisin rabdomyosarkoomasta (RMS).
Yksi A673-solujen huomattavista ominaisuuksista on niiden kyky tuottaa useita kasvutekijöitä, joilla on onkogeeninen potentiaali. Nämä solut erittävät myös kasvua estäviä tekijöitä, mikä tarjoaa tasapainoisen ympäristön solujen kasvun säätelylle. Tällaiset ominaisuudet tekevät A673-soluista erinomaisen mallin kasvainta edistävien ja kasvainta estävien tekijöiden välisen vuorovaikutuksen tutkimiseen. A673-soluilla on osoitettu olevan kasvainpotentiaalia, sillä ne voivat indusoida kasvainten muodostumista immunosuppressoituneissa hiirissä.
Lisäksi tutkimuksissa on havaittu, että A673-solulinjan syöpään liittyvien geenien promoottorit ovat hypermetyloituneet. Nämä geneettiset muutokset lisäävät entisestään sen merkitystä syöpätutkimuksessa, sillä ne tarjoavat alustan, jonka avulla voidaan tutkia epigeneettisiä muutoksia ja niiden vaikutusta kasvainten kehittymiseen ja etenemiseen.
A673-soluja kutsutaan usein Ewingin kasvaimeksi (ET) tai sarkoomaksi (ES), mutta ne yhdistetään myös rabdomyosarkoomaan (RMS). A673-solulinjalla on monimutkainen karyotyyppi, jossa on kromosomeihin 11 ja 22 liittyvä erityinen translokaatio. Tämä translokaatio johtaa EWS- ja FLI1-geenien fuusioon, mikä on tyypillinen geneettinen tapahtuma Ewingin kasvaimessa.
- Kudos
- Luu
- Sairaus
- Ewingin sarkooma
- Synonyymit
- A-673
- RMS 1598
- RMS1598
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Nainen
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Fibroblastien kaltaiset
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä, immunosuppressoituneissa hiirissä
- Kaksinkertaistumisaika
- 28 tuntia
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- A673 (Cytionin luettelonumero 300454)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0080
05Ilmentyminen ja alttius
- Viruksille altistuminen
- Erittäin herkkä ihmisen adenoviruksille
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- 1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen yksikerroksen 8 päivän kuluessa.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Luovuttajan ikä
- 15 vuotta
- Etnisyys
- Kaukasialainen
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)