Přejít na obsah
A673
Tkáň
Kost
Nemoc
Ewingův sarkom
Synonyma
A-673, RMS 1598, RMS1598

Dokumenty

A673

Cell line · Číslo výrobku 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie A673 je cenným zdrojem v biologické vědě. Tato buněčná linie, odvozená ze svalové tkáně 15leté pacientky s diagnózou Ewingsova sarkomu, vykazuje výraznou polygonální morfologii. Původně se předpokládalo, že buněčná linie pochází z rabdomyosarkomu (RMS).

Jednou z pozoruhodných vlastností buněk A673 je jejich schopnost produkovat několik růstových faktorů, které mají onkogenní potenciál. Tyto buňky rovněž vylučují faktory inhibující růst, čímž vytvářejí vyvážené prostředí pro regulaci buněčného růstu. Díky těmto vlastnostem jsou buňky A673 vynikajícím modelem pro zkoumání vzájemného působení faktorů podporujících a potlačujících vznik nádoru. Buňky A673 prokázaly tumorigenní potenciál, protože mohou vyvolat tvorbu nádorů u imunosuprimovaných myší.

Studie navíc identifikovaly hypermetylované promotory genů souvisejících s rakovinou v buněčné linii A673. Tyto genetické změny dále přispívají k jejímu významu ve výzkumu rakoviny a nabízejí platformu pro zkoumání epigenetických modifikací a jejich vlivu na vývoj a progresi nádorů.

Buňky A673 jsou často označovány jako Ewingův nádor (ET) nebo sarkom (ES), ale jsou také spojovány s rabdomyosarkomem (RMS). Pozoruhodné je, že buněčná linie A673 má komplexní karyotyp se specifickou translokací zahrnující chromozomy 11 a 22. Tato translokace vede k fúzi genů EWS a FLI1, což je charakteristická genetická událost u Ewingova nádoru.

Tkáň
Kost
Nemoc
Ewingův sarkom
Synonyma
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Žena
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Fibroblastům podobné
Tumorogenní
Ano, u imunosuprimovaných myší
Doba zdvojnásobení
28 hodin

04Identifikátory

Citace
A673 (katalogové číslo Cytion 300454)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Exprese a náchylnost

Náchylnost k virům
Vysoká citlivost na lidské adenoviry

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2 vytvoří konfluentní monovrstvu během 8 dnů.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Po rozmrazení naneste buňky v množství 5 x 104 buněk/cm2 a nechte je alespoň 24 hodin zotavit se z procesu zmrazení a přilnout.
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
15 let
Etnická příslušnost
Kavkazský