Μετάβαση στο περιεχόμενο
A673
Ιστός
Οστά
Ασθένεια
Σάρκωμα Ewing
Συνώνυμα
A-673, RMS 1598, RMS1598

Έγγραφα

A673

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά A673 είναι ένας πολύτιμος πόρος στη βιολογική επιστήμη. Προερχόμενη από τον μυϊκό ιστό μιας 15χρονης ασθενούς που διαγνώστηκε με σάρκωμα Ewings, αυτή η κυτταρική σειρά παρουσιάζει μια ξεχωριστή πολυγωνική μορφολογία. Αρχικά η κυτταρική σειρά θεωρήθηκε ότι προέρχεται από ραβδομυοσάρκωμα (RMS).

Ένα από τα αξιοσημείωτα χαρακτηριστικά των κυττάρων A673 είναι η ικανότητά τους να παράγουν διάφορους αυξητικούς παράγοντες που διαθέτουν ογκογόνο δυναμικό. Τα κύτταρα αυτά εκκρίνουν επίσης ανασταλτικούς για την ανάπτυξη παράγοντες, παρέχοντας ένα ισορροπημένο περιβάλλον για τη ρύθμιση της κυτταρικής ανάπτυξης. Οι ιδιότητες αυτές καθιστούν τα κύτταρα Α673 ένα εξαιρετικό μοντέλο για τη διερεύνηση της αλληλεπίδρασης μεταξύ παραγόντων που προάγουν και παραγόντων που καταστέλλουν τον όγκο. Τα κύτταρα A673 έχουν επιδείξει καρκινικό δυναμικό, καθώς μπορούν να προκαλέσουν σχηματισμό όγκου σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια.

Επιπλέον, μελέτες έχουν εντοπίσει υπερμεθυλιωμένους υποκινητές σε γονίδια που σχετίζονται με τον καρκίνο εντός της κυτταρικής σειράς Α673. Αυτές οι γενετικές μεταβολές συμβάλλουν περαιτέρω στη σημασία της στην έρευνα για τον καρκίνο, προσφέροντας μια πλατφόρμα για τη διερεύνηση επιγενετικών τροποποιήσεων και των επιπτώσεών τους στην ανάπτυξη και εξέλιξη των όγκων.

Ενώ τα κύτταρα A673 αναφέρονται συχνά ως όγκος Ewing (ET) ή σάρκωμα (ES), σχετίζονται επίσης με ραβδομυοσάρκωμα (RMS). Αξίζει να σημειωθεί ότι η κυτταρική σειρά A673 διαθέτει έναν πολύπλοκο καρυότυπο με μια συγκεκριμένη μετάθεση που περιλαμβάνει τα χρωμοσώματα 11 και 22. Αυτή η μετάθεση οδηγεί στη συγχώνευση των γονιδίων EWS και FLI1, η οποία αποτελεί χαρακτηριστικό γενετικό γεγονός στον όγκο Ewing.

Ιστός
Οστά
Ασθένεια
Σάρκωμα Ewing
Συνώνυμα
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Άνθρωπος
Σεξ
Γυναίκα
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Ινοβλάστες που μοιάζουν με ινοβλάστες
Ογκογόνος
Ναι, σε ανοσοκατασταλμένα ποντίκια
Χρόνος διπλασιασμού
28 ώρες

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
A673 (αριθμός καταλόγου Cytion 300454)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
9606
Κελλοσαύρος
CVCL_0080

05Έκφραση και ευαισθησία

Ευαισθησία στον ιό
Υψηλή ευαισθησία στους ανθρώπινους αδενοϊούς

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
1 x 104 κύτταρα/cm2 θα οδηγήσει σε συγχωνευμένη μονοστρωματική κυτταρική καλλιέργεια εντός 8 ημερών.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Ηλικία δωρητή
15 χρόνια
Εθνικότητα
Καυκάσιος