A673
Cell line · Product number 300454
The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...
Customization / Recommendations
- A673Cell line€430.00
Recommended (freshest lot)
01General information
- Description
Dòng tế bào A673 là một nguồn tài nguyên quý giá trong khoa học sinh học. Dòng tế bào này được phân lập từ mô cơ của một bệnh nhân nữ 15 tuổi được chẩn đoán mắc bệnh sarcoma Ewings, và có hình thái đa giác đặc trưng. Ban đầu, người ta cho rằng dòng tế bào này được phân lập từ sarcoma cơ vân (RMS).
Một trong những đặc điểm nổi bật của tế bào A673 là khả năng sản xuất nhiều yếu tố tăng trưởng có tiềm năng gây ung thư. Các tế bào này cũng tiết ra các yếu tố ức chế tăng trưởng, tạo ra một môi trường cân bằng cho việc điều tiết sự phát triển của tế bào. Những đặc tính này khiến tế bào A673 trở thành một mô hình tuyệt vời để nghiên cứu sự tương tác giữa các yếu tố thúc đẩy và ức chế ung thư. Tế bào A673 đã chứng minh tiềm năng gây ung thư, khi chúng có thể gây ra sự hình thành khối u ở chuột bị ức chế miễn dịch.
Hơn nữa, các nghiên cứu đã xác định các vùng promoter bị hypermethyl hóa trong các gen liên quan đến ung thư trong dòng tế bào A673. Những biến đổi di truyền này càng làm tăng tính ứng dụng của chúng trong nghiên cứu ung thư, cung cấp một nền tảng để khám phá các biến đổi biểu sinh và tác động của chúng đối với sự phát triển và tiến triển của khối u.
Mặc dù tế bào A673 thường được gọi là u Ewing (ET) hoặc sarcoma (ES), chúng cũng liên quan đến u rhabdomyosarcoma (RMS). Đáng chú ý, dòng tế bào A673 có karyotype phức tạp với sự chuyển đoạn cụ thể liên quan đến nhiễm sắc thể 11 và 22. Sự chuyển đoạn này dẫn đến sự hợp nhất của các gen EWS và FLI1, đây là sự kiện di truyền đặc trưng của u Ewing.
- Tissue
- Xương
- Disease
- U xương Ewing
- Synonyms
- A-673
- RMS 1598
- RMS1598
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Female
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- Tế bào giống fibroblast
- Tumourigenic
- Đúng, ở chuột bị ức chế miễn dịch
- Doubling time
- 28 giờ
04Identifiers
- Citation
- A673 (Số catalog Cytion 300454)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0080
05Expression and susceptibility
- Virus susceptibility
- Rất nhạy cảm với virus adenovirus ở người
06Handling and culture
- Culture medium
- DMEM, chứa: 4,5 g/L glucose, chứa: 4 mM L-glutamine, chứa: 3,7 g/L NaHCO₃, chứa: 1,0 mM natri pyruvate (số hiệu sản phẩm Cytion 820300a)
- Incubation atmosphere
37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.
- Supplements
- Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
- Seeding density
- 1 x 10⁴ tế bào/cm² sẽ tạo thành một lớp đơn liên tục trong vòng 8 ngày.
- Fluid renewal
- 2 đến 3 lần mỗi tuần
- Post-thaw recovery
- Sau khi rã đông, cấy tế bào với mật độ 5 x 10⁴ tế bào/cm² và để tế bào phục hồi sau quá trình đông lạnh và bám dính ít nhất 24 giờ.
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Quality control and cryopreservation
- Sterility
Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.
Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.
- Freeze medium
- Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
- Storage conditions
Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.
- Shipping conditions
Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.
08Donor
- Donor age
- 15 năm
- Ethnicity
- Người da trắng
09Legal and safety
- Safety precautions
- Khi lập kế hoạch lưu trữ ống cryovial trong nitơ lỏng để rã đông sau này, việc tuân thủ các biện pháp an toàn nghiêm ngặt là bắt buộc. Găng tay và quần áo bảo hộ phù hợp là điều cần thiết, và việc sử dụng khẩu trang hoặc kính bảo hộ là bắt buộc trong quá trình chuyển mẫu đông lạnh vào hoặc ra khỏi bể nitơ lỏng. Điều này nhằm giảm thiểu nguy cơ chấn thương do nổ ống cryovial khi lấy ra, có thể dẫn đến việc văng ra các mảnh vỡ sắc nhọn.
- Warranty
Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.
Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.
- Material Transfer Agreement required
- Yes
.jpg)