Skip to content
A673
Tissue
עצם
Disease
סרקומה של יואינג
Synonyms
A-673, RMS 1598, RMS1598

Documents

A673

Cell line · Product number 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים A673 הוא משאב יקר ערך במדעי הביולוגיה. קו תאים זה, שמקורו ברקמת השריר של מטופלת בת 15 שאובחנה עם סרקומה של יואינג, מציג מורפולוגיה מצולעת מובהקת. במקור, סברו כי קו התאים נגזר מסרקומה רבדומיוסרקומה (RMS).

אחת התכונות הבולטות של תאי A673 היא יכולתם לייצר מספר גורמי גדילה בעלי פוטנציאל אונקוגני. תאים אלה מפרישים גם גורמים המעכבים את הגדילה, ומספקים סביבה מאוזנת לוויסות הגדילה התאית. תכונות אלה הופכות את תאי A673 למודל מצוין לחקר האינטראקציה בין גורמים המעודדים גידולים לבין גורמים המעכבים גידולים. תאי A673 הוכיחו פוטנציאל אונקוגני, שכן הם יכולים לגרום להיווצרות גידולים בעכברים עם דיכוי חיסוני.

יתר על כן, מחקרים זיהו פרומוטרים היפר-מתילציה בגנים הקשורים לסרטן בתוך קו התאים A673. שינויים גנטיים אלה תורמים עוד יותר לרלוונטיות שלהם במחקר הסרטן, ומספקים פלטפורמה לחקר שינויים אפיגנטיים והשפעתם על התפתחות והתקדמות הגידול.

תאי A673 מכונים לעתים קרובות גידול יואינג (ET) או סרקומה (ES), אך הם קשורים גם לרבדומיוסרקומה (RMS). יש לציין כי קו התאים A673 מכיל קריוטיפ מורכב עם טרנסלוקציה ספציפית המערבת את הכרומוזומים 11 ו-22. טרנסלוקציה זו מובילה למיזוג הגנים EWS ו-FLI1, המהווה אירוע גנטי אופייני בגידול יואינג.

Tissue
עצם
Disease
סרקומה של יואינג
Synonyms
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
דמוי פיברובלסט
Tumourigenic
כן, בעכברים עם דיכוי חיסוני
Doubling time
28 שעות

04Identifiers

Citation
A673 (מספר קטלוגי Cytion 300454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
רגיש מאוד לאדנו-וירוסים אנושיים

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, w: 4.5 g/L גלוקוז, w: 4 mM L-גלוטמין, w: 3.7 g/L NaHCO3, w: 1.0 mM נתרן פירובט (מספר קטלוגי Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתווך 10% FBS
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Seeding density
1 x 104 תאים/סמ"ר יניבו שכבה חד-תאית מלוכדת תוך 8 ימים.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Post-thaw recovery
לאחר ההפשרה, צלחת את התאים ב-5 x 104 תאים/סמ"ר והניח לתאים להתאושש מתהליך ההקפאה ולהידבק למשך 24 שעות לפחות.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

08Donor

Donor age
15 שנים
Ethnicity
קווקזי