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A673
Tissue
Os
Disease
Sarcome d'Ewing
Synonyms
A-673, RMS 1598, RMS1598

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A673

Cell line · Product number 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

La lignée cellulaire A673 constitue une ressource précieuse en sciences biologiques. Issu du tissu musculaire d’une patiente de 15 ans chez qui un sarcome d’Ewing avait été diagnostiqué, cette lignée cellulaire présente une morphologie polygonale caractéristique. À l’origine, on pensait que cette lignée cellulaire provenait d’un rhabdomyosarcome (RMS).

L’une des caractéristiques remarquables des cellules A673 est leur capacité à produire plusieurs facteurs de croissance dotés d’un potentiel oncogénique. Ces cellules sécrètent également des facteurs inhibiteurs de croissance, créant ainsi un environnement équilibré pour la régulation de la croissance cellulaire. Ces propriétés font des cellules A673 un excellent modèle pour étudier l’interaction entre les facteurs favorisant la tumeur et ceux qui la suppriment. Les cellules A673 ont démontré un potentiel tumorigène, puisqu’elles peuvent induire la formation de tumeurs chez des souris immunodéprimées.

De plus, des études ont mis en évidence des promoteurs hyperméthylés dans des gènes liés au cancer au sein de la lignée cellulaire A673. Ces altérations génétiques renforcent encore sa pertinence dans la recherche sur le cancer, offrant une plateforme pour explorer les modifications épigénétiques et leur impact sur le développement et la progression tumorale.

Bien que les cellules A673 soient souvent désignées sous le nom de tumeur d’Ewing (ET) ou de sarcome d’Ewing (ES), elles sont également associées au rhabdomyosarcome (RMS). Il convient de noter que la lignée cellulaire A673 présente un caryotype complexe caractérisé par une translocation spécifique impliquant les chromosomes 11 et 22. Cette translocation entraîne la fusion des gènes EWS et FLI1, ce qui constitue un événement génétique caractéristique de la tumeur d’Ewing.

Tissue
Os
Disease
Sarcome d'Ewing
Synonyms
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De type fibroblaste
Tumourigenic
Oui, chez les souris immunodéprimées
Doubling time
28 heures

04Identifiers

Citation
A673 (numéro de catalogue Cytion 300454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
Très sensible aux adénovirus humains

06Handling and culture

Culture medium
DMEM, p/v : 4,5 g/L de glucose, p/v : 4 mM de L-glutamine, p/v : 3,7 g/L de NaHCO₃, p/v : 1,0 mM de pyruvate de sodium (référence Cytion 820300a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmosphère humidifiée.

Supplements
Ajouter 10 % de FBS au milieu de culture
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retirez l’ancien milieu des cellules adhérentes et lavez-les avec du PBS sans calcium ni magnésium. Pour les flacons T25, utilisez 3 à 5 ml de PBS, et pour les flacons T75, utilisez 5 à 10 ml. Ensuite, recouvrez complètement les cellules d’Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laissez les cellules incuber à température ambiante pendant 8 à 10 minutes afin de les détacher. Après l’incubation, mélangez délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifugez à 300 x g pendant 3 minutes. Éliminez le surnageant, remettez les cellules en suspension dans du milieu frais, puis transférez-les dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Seeding density
Une densité de 1 × 10⁴ cellules/cm² permettra d'obtenir une monocouche confluente en 8 jours.
Fluid renewal
2 à 3 fois par semaine
Post-thaw recovery
Après décongélation, ensemencer les cellules à une densité de 5 × 10⁴ cellules/cm² et laisser les cellules se remettre du processus de congélation et adhérer pendant au moins 24 heures.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Freeze medium
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (contenant du sérum fœtal bovin) + 10 % de DMSO pour assurer une viabilité adéquate après décongélation, ou du CM-1 (référence Cytion 800100), qui contient des osmoprotecteurs et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryoconservation.
Storage conditions

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Shipping conditions

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donor

Donor age
15 ans
Ethnicity
caucasien