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A673
Tissue
骨质
Disease
尤文氏肉瘤
Synonyms
A-673, RMS 1598, RMS1598

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A673

Cell line · Product number 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

US$395.00excl. tax and shipping
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Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A673 细胞系是生物科学的宝贵资源。该细胞系来源于一名被诊断为 Ewings 肉瘤的 15 岁女性患者的肌肉组织,具有明显的多边形形态。 最初,人们认为该细胞系来源于横纹肌肉瘤(RMS)。

A673 细胞的一个显著特点是能够产生几种具有致癌潜能的生长因子。这些细胞还能分泌生长抑制因子,为细胞生长调节提供一个平衡的环境。这些特性使 A673 细胞成为研究肿瘤促进因子和肿瘤抑制因子之间相互作用的极佳模型。A673 细胞具有致瘤潜力,因为它们能诱导免疫抑制小鼠形成肿瘤。

此外,研究还发现 A673 细胞系中与癌症有关的基因启动子甲基化过度。这些基因改变进一步提高了其在癌症研究中的相关性,为探索表观遗传修饰及其对肿瘤发生和发展的影响提供了一个平台。

虽然 A673 细胞通常被称为尤文瘤(ET)或肉瘤(ES),但它们也与横纹肌肉瘤(RMS)有关。值得注意的是,A673 细胞系具有复杂的核型,涉及 11 号和 22 号染色体的特定易位。这种易位导致 EWS 和 FLI1 基因的融合,这是尤文肿瘤的特征性基因事件。

Tissue
骨质
Disease
尤文氏肉瘤
Synonyms
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
纤维母细胞样
Tumourigenic
是,在免疫抑制小鼠中
Doubling time
28 小时

04Identifiers

Citation
A673(Cytion 目录号 300454)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Expression and susceptibility

Virus susceptibility
对人类腺病毒高度敏感

06Handling and culture

Culture medium
DMEM,w:4.5 克/升葡萄糖,w:4 毫摩尔 L-谷氨酰胺,w:3.7 克/升 NaHCO3,w:1.0 毫摩尔丙酮酸钠(Cytion 编号 820300a)。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中添加 10% FBS
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
去除粘附细胞上的旧培养基,用不含钙和镁的 PBS 冲洗。T25 烧瓶用 3-5 毫升 PBS,T75 烧瓶用 5-10 毫升。然后用 Accutase 完全覆盖细胞,T25 烧瓶用 1-2 毫升,T75 烧瓶用 2.5 毫升。让细胞在室温下孵育 8-10 分钟,使其分离。孵育后,用 10 毫升培养基轻轻混合细胞使其重悬,然后用 300xg 离心 3 分钟。弃去上清液,用新鲜培养基重悬细胞,并将其转移到已装有新鲜培养基的新烧瓶中。
Seeding density
1×10⁴个细胞/平方厘米将在8天内形成融合单层。
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解冻后,将细胞以5×10⁴个细胞/平方厘米的密度接种于培养皿中,使细胞从冷冻过程中恢复并至少贴壁24小时。
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染,每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
我们使用完全生长培养基(包括 FBS)+10% DMSO 或 CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)作为冷冻保存培养基,以获得足够的解冻后存活率,CM-1(Cytion 商品目录编号 800100)含有优化的渗透保护剂和代谢稳定剂,可提高恢复能力并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存,可将样品瓶放入气相液氮中,温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运,并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后,应立即检查容器,并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Donor age
15 年
Ethnicity
高加索人