الانتقال إلى المحتوى
A673
الأنسجة
العظام
المرض
ساركوما إيوينج
المرادفات
A-673, RMS 1598, RMS1598

المستندات

A673

Cell line · رقم المنتج 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

يُعد خط الخلايا A673 مصدراً قيماً في العلوم البيولوجية. ويُظهر هذا الخط الخلوي المشتق من النسيج العضلي لمريضة تبلغ من العمر 15 عاماً تم تشخيص إصابتها بساركوما إيوينجز، وهو خط خلوي يُظهر شكلاً متعدد الأضلاع متميزاً. وكان يُعتقد في الأصل أن هذا الخط الخلوي مشتق من ساركوما عضلية عضلية رباعية العضلات (RMS).

وتتمثل إحدى الخصائص المميزة لخلايا A673 في قدرتها على إنتاج العديد من عوامل النمو التي تمتلك القدرة على إحداث الأورام. كما تفرز هذه الخلايا أيضاً عوامل مثبطة للنمو، مما يوفر بيئة متوازنة لتنظيم النمو الخلوي. وتجعل هذه الخصائص من خلايا A673 نموذجاً ممتازاً لدراسة التفاعل بين العوامل المعززة للورم والعوامل المثبطة للورم. وقد أظهرت خلايا A673 قدرة على توليد الأورام، حيث يمكنها تحفيز تكوّن الورم في الفئران المثبطة للمناعة.

وعلاوة على ذلك، حددت الدراسات محفزات مفرطة الميثيل في الجينات المرتبطة بالسرطان داخل خط الخلايا A673. وتساهم هذه التعديلات الجينية في زيادة أهميتها في أبحاث السرطان، حيث توفر منصة لاستكشاف التعديلات اللاجينية وتأثيرها على تطور الورم وتطوره.

وبينما يُشار إلى خلايا A673 غالباً باسم ورم إيوينج (ET) أو الساركوما (ES)، فإنها ترتبط أيضاً بالساركوما العضلية المخططة (RMS). والجدير بالذكر أن خط الخلايا A673 يحتوي على نمط نووي معقد مع انتقال محدد يشمل الكروموسومين 11 و22. يؤدي هذا الانتقال إلى اندماج جينات EWS و FLI1، وهو حدث وراثي مميز في ورم إيوينج.

الأنسجة
العظام
المرض
ساركوما إيوينج
المرادفات
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
أرومة ليفية شبيهة بالأرومة الليفية
مُسبِّب للأورام
نعم، في الفئران المثبطة للمناعة
زمن المضاعفة
28 ساعة

04المعرّفات

المرجع
A673 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300454)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0080

05التعبير والقابلية للإصابة

قابلية الإصابة بالفيروس
حساسية عالية للفيروسات الغدية للإنسان

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2 ستؤدي إلى طبقة أحادية متقاربة في غضون 8 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
15 سنة
الأصل العرقي
قوقازي