Prejsť na obsah
A673
Tkanivo
Kosti
Choroba
Ewingov sarkóm
Synonymá
A-673, RMS 1598, RMS1598

Dokumenty

A673

Cell line · Číslo výrobku 300454

The A673 cell line is a valuable resource in biological science. Derived from the muscle tissue of a 15-year-old female patient diagnosed with Ewings Sarc...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunková línia A673 je cenným zdrojom v biologickej vede. Táto bunková línia, odvodená zo svalového tkaniva 15-ročnej pacientky s diagnózou Ewingsov sarkóm, vykazuje výraznú polygonálnu morfológiu. Pôvodne sa predpokladalo, že táto bunková línia pochádza z rabdomyosarkómu (RMS).

Jednou z pozoruhodných vlastností buniek A673 je ich schopnosť produkovať niekoľko rastových faktorov, ktoré majú onkogénny potenciál. Tieto bunky vylučujú aj faktory inhibujúce rast, čím poskytujú vyvážené prostredie pre reguláciu bunkového rastu. Vďaka týmto vlastnostiam sú bunky A673 vynikajúcim modelom na skúmanie vzájomného pôsobenia faktorov podporujúcich a potláčajúcich vznik nádorov. Bunky A673 preukázali nádorový potenciál, pretože môžu indukovať tvorbu nádorov u imunosuprimovaných myší.

Okrem toho štúdie identifikovali hypermetylované promótory v génoch súvisiacich s rakovinou v bunkovej línii A673. Tieto genetické zmeny ďalej prispievajú k jej významu vo výskume rakoviny a ponúkajú platformu na skúmanie epigenetických modifikácií a ich vplyvu na vývoj a progresiu nádorov.

Hoci sa bunky A673 často označujú ako Ewingov nádor (ET) alebo sarkóm (ES), spájajú sa aj s rabdomyosarkómom (RMS). Bunková línia A673 má komplexný karyotyp so špecifickou translokáciou zahŕňajúcou chromozómy 11 a 22. Táto translokácia vedie k fúzii génov EWS a FLI1, čo je charakteristická genetická udalosť pri Ewingovom nádore.

Tkanivo
Kosti
Choroba
Ewingov sarkóm
Synonymá
  • A-673
  • RMS 1598
  • RMS1598

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Žena
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Fibroblastom podobné
Tumorigenický
Áno, u imunosuprimovaných myší
Doba zdvojnásobenia
28 hodín

04Identifikátory

Citácia
A673 (katalógové číslo Cytion 300454)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0080

05Prejav a náchylnosť

Náchylnosť na vírusy
Vysoká citlivosť na ľudské adenovírusy

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2 bude mať za následok konfluentnú monovrstvu do 8 dní.
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
15 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský