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AML12
Tissu
Foie
Synonymes
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

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AML12

Cell line · Référence du produit 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

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01Informations générales

Description

Les cellules AML12, également connues sous le nom de cellules Alpha Mouse Liver 12, sont une lignée de cellules épithéliales non tumorales dérivées du foie d'une souris transgénique. Ces cellules ont été initialement développées pour fournir un modèle in vitro adapté à l'étude de la fonction hépatocytaire et de la biologie du foie de la souris adulte. Les cellules AML12 expriment des caractéristiques typiques des hépatocytes différenciés, notamment la production d'albumine, de transferrine et d'autres protéines spécifiques du foie, ce qui en fait une ressource inestimable pour la recherche en toxicologie, le métabolisme des médicaments et les maladies du foie.

La lignée cellulaire a été créée à partir d'hépatocytes isolés d'une souris portant un transgène pour le facteur de croissance transformant alpha humain (TGF-alpha), sous le contrôle du promoteur de la métallothionéine-I de la souris. Cette altération génétique contribue à l'immortalisation des cellules sans perturber leur état différencié. Les cellules AML12 conservent un phénotype et un caryotype stables dans des conditions de culture cellulaire standard, qui incluent une exigence unique de dexaméthasone et d'insuline-transferrine-sélénium dans le milieu de croissance pour promouvoir la prolifération et maintenir les fonctions spécifiques des hépatocytes.

Tissu
Foie
Applications
culture cellulaire 3D, Criblage à haut débit, Toxicologie
Synonymes
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Classification

Organisme
Souris
Sexe
Homme
Propriétés de croissance
Adepte
Statut OGM
GMO-S1
Informations détaillées sur le statut OGM
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Niveau de biosécurité
1

03Caractéristiques

Morphologie
Épithéliale
Type de cellule
Hépatocyte

04Identifiants

Référence
AML12 (numéro de catalogue Cytion 300643)
Numéro d'identification fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Expression et sensibilité

Produits
Les cellules expriment des niveaux élevés de TGF alpha humain et des niveaux plus faibles de TGF alpha de souris.

06Manipulation et culture

Milieu de culture
DMEM:Ham's F12 (1:1), w : 3.1 g/L Glucose, w : 2.5 mM L-Glutamine, w : 15 mM HEPES, w : 0.5 mM Sodium pyruvate, w : 1.2 g/L NaHCO3 (numéro d'article Cytion 820400a)
Atmosphère d'incubation

37°C, 5%CO2, atmosphère humidifiée.

Compléments alimentaires
Compléter le milieu avec 10 % de FBS, 10 microgrammes/ml d'insuline, 5,5 microgrammes/ml de transferrine, 5 ng/ml de sélénium, 40 ng/ml de dexaméthasone
Réactif de dissociation
Accutase
Repiquage
Retirer l'ancien milieu des cellules adhérentes et les laver avec du PBS dépourvu de calcium et de magnésium. Pour les flacons T25, utiliser 3-5 ml de PBS, et pour les flacons T75, 5-10 ml. Ensuite, recouvrir complètement les cellules avec Accutase, en utilisant 1 à 2 ml pour les flacons T25 et 2,5 ml pour les flacons T75. Laisser les cellules incuber à température ambiante pendant 8-10 minutes pour les détacher. Après incubation, mélanger délicatement les cellules avec 10 ml de milieu pour les remettre en suspension, puis centrifuger à 300xg pendant 3 minutes. Jeter le surnageant, remettre les cellules en suspension dans du milieu frais et les transférer dans de nouveaux flacons contenant déjà du milieu frais.
Décongélation et mise en culture
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Contrôle qualité et cryoconservation

Stérilité

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Milieu de congélation
Comme milieu de cryoconservation, nous utilisons un milieu de croissance complet (comprenant du FBS) + 10 % de DMSO pour une viabilité adéquate après décongélation, ou CM-1 (numéro de catalogue 800100 de Cytion), qui comprend des osmoprotectants et des stabilisateurs métaboliques optimisés pour améliorer la récupération et réduire le stress induit par la cryogénisation.
Conditions de stockage

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Conditions de livraison

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

08Donateur

Race / sous-espèce
CD-1 MT42 transgénique
Âge du donneur
3 mois