AML12
Cell line · Tuotenumero 300643
AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...
Räätälöinti / Suositukset
- AML12Cell line€600.00
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
AML12-solut, jotka tunnetaan myös nimellä Alpha Mouse Liver 12 -solut, ovat ei-kasvainperäinen epiteelisolulinja, joka on peräisin siirtogeenisen hiiren maksasta. Nämä solut kehitettiin alun perin tarjoamaan sopiva in vitro -malli aikuisen hiiren hepatosyyttien toiminnan ja maksan biologian tutkimiseen. AML12-solut ilmentävät erilaistuneille hepatosyyteille tyypillisiä ominaisuuksia, kuten albumiinin, transferriinin ja muiden maksaspesifisten proteiinien tuotantoa, mikä tekee niistä korvaamattoman arvokkaan resurssin toksikologian, lääkeaineenvaihdunnan ja maksasairauksien tutkimukseen.
Solulinja perustettiin hiirestä eristetyistä hepatosyyteistä, joissa oli ihmisen transformoivan kasvutekijä alfan (TGF-alfa) siirtogeeni hiiren metallotionein-I-promoottorin ohjaamana. Tämä geneettinen muutos edistää solujen kuolemattomuutta häiritsemättä niiden erilaistunutta tilaa. AML12-solut säilyttävät vakaan fenotyypin ja karyotyypin tavanomaisissa soluviljelyolosuhteissa, joihin sisältyy ainutlaatuinen vaatimus deksametasonin ja insuliini-transferriini-seleniumin käytöstä kasvualustassa proliferaation edistämiseksi ja hepatosyyttispesifisten toimintojen ylläpitämiseksi.
- Kudos
- Maksa
- Sovellukset
- 3D-soluviljely, Suuren läpimenon seulonta, Toksikologia
- Synonyymit
- AML-12
- AML 12
- Alpha Mouse Liver 12
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- GMO-status
- GMO-S1
- GMO-statuksen tiedot
- GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
- Solutyyppi
- Hepatosyytti
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- AML12 (Cytionin luettelonumero 300643)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0140
05Ilmentyminen ja alttius
- Tuotteet
- Solut ilmentävät suuria määriä ihmisen TGF-alfaa ja pienempiä määriä hiiren TGF-alfaa.
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoosia, w: 2,5 mM L-glutamiinia, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvaattia, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820400a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 % FBS:llä, 10 mikrogrammaa/ml insuliinia, 5,5 mikrogrammaa/ml transferriiniä, 5 ng/ml seleeniä, 40 ng/ml deksametasonia
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- CD-1 MT42 siirtogeeninen
- Luovuttajan ikä
- 3 kuukautta
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)