AML12
Cell line · رقم المنتج 300643
AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...
التخصيص / التوصيات
- AML12Cell line€600.00
01معلومات عامة
- الوصف
خلايا AML12، والمعروفة أيضاً باسم خلايا كبد ألفا ماوس 12، هي خط خلايا طلائية غير ورمية مشتقة من كبد فأر معدّل وراثياً. طُورت هذه الخلايا في البداية لتوفير نموذج مناسب في المختبر لدراسة وظيفة الخلايا الكبدية وبيولوجيا الكبد لدى الفأر البالغ. تعبّر خلايا AML12 عن الخصائص النموذجية للخلايا الكبدية المتمايزة، بما في ذلك إنتاج الألبومين والترانسفيرين والبروتينات الأخرى الخاصة بالكبد، مما يجعلها مورداً لا يقدر بثمن للأبحاث في علم السموم واستقلاب الأدوية وأمراض الكبد.
تم إنشاء هذا الخط الخلوي من خلايا كبدية معزولة من فأر يحمل جيناً متحوّلاً لعامل النمو البشري المتحول ألفا (TGF-alpha)، تحت سيطرة محفز ميتالوثيونين- I للفأر. يساهم هذا التغيير الجيني في تخليد الخلايا دون تعطيل حالتها المتمايزة. تحافظ خلايا AML12 على النمط الظاهري والنمط النووي المستقر في ظل ظروف زراعة الخلايا القياسية، والتي تتضمن متطلبات فريدة من نوعها للديكساميثازون والأنسولين-ترانسفيرين-سيلينيوم في وسط النمو لتعزيز الانتشار والحفاظ على الوظائف الخاصة بالخلايا الكبدية.
- الأنسجة
- الكبد
- التطبيقات
- مزرعة الخلايا ثلاثية الأبعاد، الفحص عالي الإنتاجية، علم السموم
- المرادفات
- AML-12
- AML 12
- Alpha Mouse Liver 12
02التصنيف
- كائن حي
- الماوس
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1
- تفاصيل حالة الكائنات المعدلة وراثيًا
- GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
- نوع الخلية
- الخلية الكبدية
04المعرّفات
- المرجع
- AML12 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300643)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 10090
- سيلوصور
- CVCL_0140
05التعبير والقابلية للإصابة
- المنتجات
- تعبّر الخلايا عن مستويات عالية من عامل النمو البشري TGF alpha ومستويات أقل من عامل النمو البشري TGF alpha للفأر.
06التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- يُضاف إلى الوسط 10٪ FBS، و10 ميكروغرام/ملل من الأنسولين، و5.5 ميكروغرام/ملل من الترانسفيرين، و5 نانوغرام/ملل من السيلينيوم، و40 نانوغرام/ملل من الديكساميثازون
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
08المانح
- السلالة / النوع الفرعي
- CD-1 MT42 المعدلة وراثيًا
- عمر المتبرع
- 3 أشهر
09الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
.jpg)