Prejsť na obsah
AML12
Tkanivo
Pečeň
Synonymá
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumenty

AML12

Cell line · Číslo výrobku 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky AML12, známe aj ako bunky Alpha Mouse Liver 12, sú netumoróznou epitelovou bunkovou líniou odvodenou z pečene transgénnej myši. Tieto bunky boli pôvodne vyvinuté s cieľom poskytnúť vhodný in vitro model na štúdium funkcie hepatocytov a biológie pečene dospelej myši. Bunky AML12 vyjadrujú vlastnosti typické pre diferencované hepatocyty vrátane produkcie albumínu, transferínu a iných proteínov špecifických pre pečeň, čo z nich robí neoceniteľný zdroj pre výskum v oblasti toxikológie, metabolizmu liečiv a ochorení pečene.

Bunková línia bola vytvorená z hepatocytov izolovaných z myší, ktoré sú nositeľmi transgénu pre ľudský transformujúci rastový faktor alfa (TGF-alfa) pod kontrolou promótora myšieho metalotioneínu-I. Táto genetická zmena prispieva k imortalizácii buniek bez narušenia ich diferencovaného stavu. Bunky AML12 si udržiavajú stabilný fenotyp a karyotyp za štandardných podmienok bunkovej kultúry, ktoré zahŕňajú jedinečnú požiadavku na dexametazón a inzulín-transferín-selén v rastovom médiu na podporu proliferácie a udržiavanie hepatocytovo špecifických funkcií.

Tkanivo
Pečeň
Aplikácie
3D bunkové kultúry, vysoko výkonný skríning, toxikológia
Synonymá
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klasifikácia

Organizmus
Myš
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Stav GMO
GMO-S1
Podrobnosti o štatúte GMO
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelové
Typ bunky
Hepatocyty

04Identifikátory

Citácia
AML12 (katalógové číslo Cytion 300643)
Daňové identifikačné číslo NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Prejav a náchylnosť

Produkty
Bunky exprimujú vysoké hladiny ľudského TGF alfa a nižšie hladiny myšieho TGF alfa.

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium 10 % FBS, 10 mikrogramov/ml inzulínu, 5,5 mikrogramu/ml transferínu, 5 ng/ml selénu, 40 ng/ml dexametazónu
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Plemeno / poddruh
CD-1 MT42 transgénny
Vek darcu
3 mesiace