Preskoči na vsebino
AML12
Tkivo
Jetra
Sinonimi
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumenti

AML12

Cell line · Številka izdelka 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
  • CoA
  • CoA
1

01Splošne informacije

Opis

Celice AML12, znane tudi kot celice Alpha Mouse Liver 12, so netumorozna epitelijska celična linija, pridobljena iz jeter transgene miši. Te celice so bile prvotno razvite kot primeren in vitro model za preučevanje delovanja hepatocitov in biologije jeter odrasle miši. Celice AML12 izražajo značilnosti, značilne za diferencirane hepatocite, vključno s proizvodnjo albumina, transferina in drugih za jetra specifičnih beljakovin, zato so neprecenljiv vir za raziskave na področju toksikologije, presnove zdravil in bolezni jeter.

Celična linija je bila ustvarjena iz hepatocitov, izoliranih iz miši, ki ima transgen za človeški transformirajoči rastni faktor alfa (TGF-alfa) pod nadzorom promotorja mišjega metalotioneina-I. Ta genetska sprememba prispeva k nesmrtnosti celic, ne da bi prekinila njihovo diferencirano stanje. Celice AML12 ohranjajo stabilen fenotip in kariotip v standardnih pogojih celične kulture, kar vključuje edinstveno zahtevo po deksametazonu in inzulin-transferin-selenu v rastnem gojišču za spodbujanje proliferacije in ohranjanje specifičnih funkcij hepatocitov.

Tkivo
Jetra
Uporaba
3D celična kultura, Visokozmogljivo presejanje, Toksikologija
Sinonimi
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Status GSO
GMO-S1
Podrobnosti o statusu GSO
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijski
Vrsta celice
Hepatociti

04Identifikatorji

Navajanje vira
AML12 (kataloška številka Cytion 300643)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Izražanje in dovzetnost

Izdelki
Celice izražajo visoko raven človeškega TGF alfa in nižjo raven mišjega TGF alfa.

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukoze, w: 2,5 mM L-glutamina, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrijevega piruvata, w: 1,2 g/L NaHCO3 (številka izdelka Cytion 820400a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS, 10 mikrogramov/ml inzulina, 5,5 mikrogramov/ml transferina, 5 ng/ml selena, 40 ng/ml deksametazona
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
CD-1 MT42 transgeni
Starost darovalca
3 mesece