Tartalomra ugrás
AML12
Szövet
Máj
Szinonimák
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumentumok

AML12

Cell line · Termékszám 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az AML12 sejtek, más néven Alpha Mouse Liver 12 sejtek, egy transzgenikus egér májából származó, nem daganatos epithel sejtvonal. Ezeket a sejteket eredetileg azért fejlesztették ki, hogy megfelelő in vitro modellt biztosítsanak a felnőtt egér hepatocita funkciójának és májbiológiájának tanulmányozására. Az AML12 sejtek a differenciált hepatocitákra jellemző tulajdonságokat fejeznek ki, beleértve az albumin, a transzferrin és más májspecifikus fehérjék termelését, így felbecsülhetetlen értékű forrássá válnak a toxikológiai, gyógyszer-metabolizmus és májbetegségek kutatásában.

A sejtvonalat olyan egérből izolált hepatocitákból hozták létre, amelyek humán transzformáló növekedési faktor alfa (TGF-alfa) transzgént hordoznak az egér metallothionein-I promóterének irányítása alatt. Ez a genetikai módosítás hozzájárul a sejtek immortalizációjához anélkül, hogy differenciált állapotukat megzavarná. Az AML12 sejtek stabil fenotípust és kariotípust tartanak fenn standard sejttenyésztési körülmények között, ami magában foglalja a dexametazon és az inzulin-transzferrin-szelénium egyedülálló igényét a növekedési közegben a proliferáció elősegítése és a hepatocita-specifikus funkciók fenntartása érdekében.

Szövet
Máj
Alkalmazások
3D sejtkultúra, nagy áteresztőképességű szűrés, toxikológia
Szinonimák
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
GMO-státusz
GMO-S1
A GMO-státuszra vonatkozó részletek
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelialis
Sejttípus
Hepatocita

04Azonosítók

Hivatkozás
AML12 (Cytion katalógusszám 300643)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Kifejeződés és fogékonyság

Termékek
A sejtek magas szinten expresszálják a humán TGF-alfa, és alacsonyabb szinten az egér TGF-alfa-t.

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükóz, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nátrium-piruvát, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion 820400a cikkszám)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel, 10 mikrogramm/mL inzulinnal, 5,5 mikrogramm/mL transzferrinnel, 5 ng/mL szelénnel, 40 ng/mL dexametazonnal kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
CD-1 MT42 transzgenikus
Az adományozó életkora
3 hónap