Ga naar de inhoud
AML12
Weefsel
Lever
Synoniemen
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Documenten

AML12

Cell line · Productnummer 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

AML12 cellen, ook bekend als Alpha Mouse Liver 12 cellen, zijn een niet-tumorigene epitheliale cellijn afkomstig van de lever van een transgene muis. Deze cellen werden oorspronkelijk ontwikkeld om een geschikt in vitro model te bieden voor het bestuderen van de hepatocytenfunctie en leverbiologie van de volwassen muis. AML12 cellen hebben typische kenmerken van gedifferentieerde hepatocyten, waaronder de productie van albumine, transferrine en andere leverspecifieke eiwitten, waardoor ze van onschatbare waarde zijn voor onderzoek naar toxicologie, medicijnmetabolisme en leverziekten.

De cellijn is gemaakt van hepatocyten geïsoleerd uit een muis met een transgen voor de menselijke transformerende groeifactor alfa (TGF-alfa), onder controle van de promoter voor muismetallothioneïne-I. Deze genetische verandering draagt bij aan de immortalisatie van de cellen zonder hun gedifferentieerde toestand te verstoren. AML12 cellen behouden een stabiel fenotype en karyotype onder standaard celkweekomstandigheden, waaronder een unieke behoefte aan dexamethason en insuline-transferrine-selenium in het groeimedium om de proliferatie te bevorderen en hepatocyt-specifieke functies te behouden.

Weefsel
Lever
Toepassingen
3D celkweek, High-throughput screening, Toxicologie
Synoniemen
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Classificatie

Organisme
Muis
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
GGO-status
GMO-S1
Details over de GGO-status
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Celtype
Hepatocyt

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
AML12 (Cytion catalogusnummer 300643)
NCBI-belastingnummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Expressie en vatbaarheid

Producten
De cellen brengen hoge concentraties humaan TGF-alfa tot expressie en lagere concentraties muizen TGF-alfa.

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamine, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Natriumpyruvaat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS, 10 microgram/mL insuline, 5,5 microgram/mL transferrine, 5 ng/mL selenium, 40 ng/mL dexamethason
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Soort / ondersoort
CD-1 MT42 transgeen
Leeftijd van de donor
3 maanden