Gå direkte til indholdet
AML12
Væv
Lever
Synonymer
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumenter

AML12

Cell line · Varenummer 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

AML12-celler, også kendt som Alpha Mouse Liver 12-celler, er en ikke-tumorigen epitelcellelinje, der stammer fra leveren hos en transgen mus. Disse celler blev oprindeligt udviklet til at give en passende in vitro-model til undersøgelse af hepatocytfunktionen og leverbiologien hos den voksne mus. AML12-celler udtrykker karakteristika, der er typiske for differentierede hepatocytter, herunder produktion af albumin, transferrin og andre leverspecifikke proteiner, hvilket gør dem til en uvurderlig ressource for forskning i toksikologi, lægemiddelmetabolisme og leversygdomme.

Cellelinjen blev etableret fra hepatocytter isoleret fra en mus med et transgen for human transforming growth factor alpha (TGF-alpha) under kontrol af musens metallothionein-I-promotor. Denne genetiske ændring bidrager til udødeliggørelse af cellerne uden at forstyrre deres differentierede tilstand. AML12-celler opretholder en stabil fænotype og karyotype under standardcellekulturforhold, hvilket inkluderer et unikt krav om dexamethason og insulin-transferrin-selenium i vækstmediet for at fremme spredning og opretholde hepatocytspecifikke funktioner.

Væv
Lever
Anvendelser
3D-cellekultur, High-throughput screening, Toksikologi
Synonymer
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klassificering

Organisme
Mus
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial
Celletype
Hepatocyt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
AML12 (Cytion katalognummer 300643)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Udtryk og modtagelighed

Produkter
Cellerne udtrykker høje niveauer af human TGF alfa og lavere niveauer af muse-TGF alfa.

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Tilsæt mediet 10 % FBS, 10 mikrogram/mL insulin, 5,5 mikrogram/mL transferrin, 5 ng/mL selen, 40 ng/mL dexamethason
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Race / underart
CD-1 MT42 transgen
Donorens alder
3 måneder