Pereiti prie turinio
AML12
Audinys
Kepenys
Sinonimai
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumentai

AML12

Cell line · Prekės numeris 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

AML12 ląstelės, dar vadinamos Alpha Mouse Liver 12 ląstelėmis, yra netumorigeninė epitelinių ląstelių linija, gauta iš transgeninės pelės kepenų. Šios ląstelės iš pradžių buvo sukurtos siekiant sukurti tinkamą in vitro modelį suaugusios pelės hepatocitų funkcijai ir kepenų biologijai tirti. AML12 ląstelės pasižymi diferencijuotiems hepatocitams būdingomis savybėmis, įskaitant albumino, transferino ir kitų kepenims būdingų baltymų gamybą, todėl jos yra neįkainojamas šaltinis toksikologijos, vaistų metabolizmo ir kepenų ligų tyrimams.

Ląstelių linija buvo sukurta iš hepatocitų, išskirtų iš pelės, turinčios žmogaus transformuojančio augimo faktoriaus alfa (TGF-alfa) transgeną, kontroliuojamą pelės metaltioneino-I promotoriaus. Šis genetinis pokytis padeda ląstelėms tapti nemirtingomis, nesutrikdydamas jų diferencijuotos būsenos. AML12 ląstelės išlaiko stabilų fenotipą ir kariotipą standartinėmis ląstelių kultūros sąlygomis, kurioms būdingas unikalus deksametazono ir insulino-transferino-seleno reikalavimas augimo terpėje, kad būtų skatinama proliferacija ir palaikomos hepatocitams būdingos funkcijos.

Audinys
Kepenys
Paraiškos
3D ląstelių kultūros, didelio našumo atranka, toksikologija
Sinonimai
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Epitelis
Ląstelių tipas
Hepatocitai

04Identifikatoriai

Nuoroda
AML12 (Cytion katalogo numeris 300643)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Išraiška ir jautrumas

Produktai
Ląstelės išreiškia daug žmogaus TGF alfa ir mažiau pelės TGF alfa.

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l gliukozės, w: 2,5 mM L-glutamino, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natrio piruvato, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion gaminio numeris 820400a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS, 10 mikrogramų/ml insulino, 5,5 mikrogramo/ml transferino, 5 ng/ml seleno, 40 ng/ml deksametazono
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Veislė / porūšis
CD-1 MT42 transgeninis
Donoro amžius
3 mėnesiai