Skip to content
AML12
Tissue
ตับ
Synonyms
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Documents

AML12

Cell line · Product number 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ AML12 หรือที่รู้จักกันในชื่อ Alpha Mouse Liver 12 cells เป็นสายเซลล์เยื่อบุผิวที่ไม่ก่อให้เกิดเนื้องอกซึ่งได้มาจากตับของหนูดัดแปลงพันธุกรรม เซลล์เหล่านี้ถูกพัฒนาขึ้นครั้งแรกเพื่อเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองที่เหมาะสมสำหรับการศึกษาการทำงานของเซลล์ตับและชีววิทยาของตับในหนูโตเต็มวัยเซลล์ AML12 แสดงลักษณะเฉพาะของเซลล์ตับที่เจริญเต็มที่ รวมถึงการผลิตอัลบูมิน, ทรานส์เฟอริน และโปรตีนเฉพาะตับอื่น ๆ ทำให้เป็นทรัพยากรที่มีค่าอย่างยิ่งสำหรับการวิจัยในด้านพิษวิทยา, การเผาผลาญยา, และโรคตับ

เซลล์ไลน์นี้ถูกสร้างขึ้นจากเซลล์ตับที่แยกได้จากหนูซึ่งมียีนแทรกสำหรับตัวกระตุ้นการเจริญเติบโตของมนุษย์ชนิดอัลฟา (TGF-alpha) ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์เมทัลโลไทโอนีน-I ของหนู การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมนี้มีส่วนช่วยในการทำให้เซลล์มีชีวิตยืนยาวโดยไม่รบกวนสถานะที่แตกต่างของเซลล์เซลล์ AML12 รักษาฟีโนไทป์และคาริโอไทป์ให้คงที่ภายใต้สภาวะการเพาะเลี้ยงเซลล์มาตรฐาน ซึ่งรวมถึงความต้องการเฉพาะสำหรับเดกซาเมทาโซนและอินซูลิน-ทรานส์เฟอร์ริน-ซีลีเนียมในอาหารเลี้ยงเซลล์เพื่อส่งเสริมการเพิ่มจำนวนและรักษาหน้าที่เฉพาะของเซลล์ตับ

Tissue
ตับ
Applications
การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบสามมิติ, การคัดกรองแบบความจุสูง, พิษวิทยา
Synonyms
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว
Cell type
เซลล์ตับ

04Identifiers

Citation
AML12 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300643)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Expression and susceptibility

Products
เซลล์แสดงระดับสูงของ TGF alpha ของมนุษย์และระดับต่ำของ TGF alpha ของหนู

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมสารอาหารลงในอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%, อินซูลิน 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, ทรานส์เฟอร์ริน 5.5 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, ซีลีเนียม 5 นาโนกรัม/มิลลิลิตร, และเดกซาเมทาโซน 40 นาโนกรัม/มิลลิลิตร
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Breed / subspecies
ซีดี-1 เอ็มที42 ทรานส์เจนิก
Donor age
3 เดือน