Gå til innholdet
AML12
Vev
Lever
Synonymer
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumenter

AML12

Cell line · Produktnummer 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
  • CoA
  • CoA
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

AML12-celler, også kjent som Alpha Mouse Liver 12-celler, er en ikke-tumorogen epitelcellelinje som stammer fra leveren til en transgen mus. Disse cellene ble opprinnelig utviklet for å gi en egnet in vitro-modell for studier av hepatocyttfunksjon og leverbiologi hos voksne mus. AML12-celler uttrykker egenskaper som er typiske for differensierte hepatocytter, blant annet produksjon av albumin, transferrin og andre leverspesifikke proteiner, noe som gjør dem til en uvurderlig ressurs for forskning innen toksikologi, legemiddelmetabolisme og leversykdom.

Cellelinjen ble etablert fra hepatocytter isolert fra en mus med et transgen for human transforming growth factor alpha (TGF-alfa), kontrollert av musens metallothionein-I-promoter. Denne genetiske endringen bidrar til udødeliggjøring av cellene uten å forstyrre deres differensierte tilstand. AML12-cellene opprettholder en stabil fenotype og karyotype under standard cellekulturbetingelser, noe som inkluderer et unikt behov for deksametason og insulin-transferrin-selenium i vekstmediet for å fremme proliferasjon og opprettholde hepatocyttspesifikke funksjoner.

Vev
Lever
Søknader
3D-cellekultur, screening med høy gjennomstrømning, toksikologi
Synonymer
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Celletype
Hepatocytt

04Identifikatorer

Kildehenvisning
AML12 (Cytion-katalognummer 300643)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Uttrykk og mottakelighet

Produkter
Cellene uttrykker høye nivåer av human TGF alfa og lavere nivåer av TGF alfa fra mus.

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glukose, w: 2,5 mM L-glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM natriumpyruvat, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820400a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Tilsett 10 % FBS, 10 mikrogram/mL insulin, 5,5 mikrogram/mL transferrin, 5 ng/mL selen, 40 ng/mL deksametason
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
CD-1 MT42 transgen
Donorens alder
3 måneder