AML12
Cell line · Номер на продукта 300643
AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...
Персонализиране / Препоръки
- AML12Cell line€600.00
01Обща информация
- Описание
Клетките AML12, известни също като клетки Alpha Mouse Liver 12, са нетуморогенна епителна клетъчна линия, получена от черния дроб на трансгенна мишка. Тези клетки първоначално са разработени, за да осигурят подходящ in vitro модел за изследване на функцията на хепатоцитите и биологията на черния дроб на възрастна мишка. Клетките AML12 изразяват характеристики, типични за диференцираните хепатоцити, включително производството на албумин, трансферин и други специфични за черния дроб протеини, което ги прави безценен ресурс за изследвания в областта на токсикологията, метаболизма на лекарствата и чернодробните заболявания.
Клетъчната линия е създадена от хепатоцити, изолирани от мишка, носеща трансген за човешки трансформиращ растежен фактор алфа (TGF-alpha), под контрола на мишия промотор на металотионеин-I. Тази генетична промяна допринася за безсмъртието на клетките, без да нарушава диференцираното им състояние. Клетките AML12 поддържат стабилен фенотип и кариотип при стандартни условия на клетъчна култура, което включва уникално изискване за дексаметазон и инсулин-трансферин-селен в растежната среда, за да се стимулира пролиферацията и да се поддържат специфичните за хепатоцитите функции.
- Тъкан
- Черен дроб
- Приложения
- 3D клетъчна култура, Високопроизводителен скрининг, Токсикология
- Синоними
- AML-12
- AML 12
- Alpha Mouse Liver 12
02Класификация
- Организъм
- Мишка
- Секс
- Мъж
- Свойства, свързани с растежа
- Привърженик
- Статус на ГМО
- GMO-S1
- Подробности относно статуса на ГМО
- GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Ниво на биологична безопасност
- 1
03Характеристики
- Морфология
- Епителиален
- Тип клетка
- Хепатоцити
04Идентификатори
- Източник
- AML12 (каталожен номер 300643 на Cytion)
- Данъчен идентификационен номер в NCBI
- 10090
- Целозавър
- CVCL_0140
05Проява и предразположеност
- Продукти
- Клетките експресират високи нива на човешкия TGF алфа и по-ниски нива на мишия TGF алфа.
06Обработка и отглеждане
- Хранителна среда
- DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
- Атмосфера за инкубация
37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.
- Добавки
- Допълнете средата с 10% FBS, 10 микрограма/ml инсулин, 5,5 микрограма/ml трансферин, 5 ng/ml селен, 40 ng/ml дексаметазон
- Реагент за дисоциация
- Accutase
- Пресаждане
- Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
- Размразяване и култивиране
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Контрол на качеството и криоконсервация
- Стерилност
Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.
За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.
- Среда за замразяване
- Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
- Условия за съхранение
За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.
- Условия за доставка
Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.
08Дарител
- Порода / подвид
- CD-1 MT42 трансгенен
- Възраст на донора
- 3 месеца
09Правни въпроси и безопасност
- Мерки за безопасност
- Когато планирате да съхранявате криопрепарат в течен азот за бъдещо размразяване, е задължително да спазвате строги мерки за безопасност. Подходящите защитни ръкавици и облекло са от съществено значение, а по време на прехвърлянето на замразени проби към или от резервоара с течен азот е необходимо да се използва маска за лице или предпазни очила. Това се прави, за да се намали рискът от нараняване от потенциални експлозии на криовиолите при изваждането им, които могат да доведат до изхвърляне на остри фрагменти.
- Гаранция
Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа
За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация
- Необходимо е споразумение за прехвърляне на материали
- Да
.jpg)