Μετάβαση στο περιεχόμενο
AML12
Ιστός
Ήπαρ
Συνώνυμα
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Έγγραφα

AML12

Cell line · Αριθμός προϊόντος 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
  • CoA
  • CoA
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Τα κύτταρα AML12, επίσης γνωστά ως κύτταρα Alpha Mouse Liver 12, είναι μια μη καρκινική επιθηλιακή κυτταρική σειρά που προέρχεται από το ήπαρ ενός διαγονιδιακού ποντικού. Τα κύτταρα αυτά αναπτύχθηκαν αρχικά για να παρέχουν ένα κατάλληλο in vitro μοντέλο για τη μελέτη της λειτουργίας των ηπατοκυττάρων και της βιολογίας του ήπατος του ενήλικου ποντικού. Τα κύτταρα AML12 εκφράζουν χαρακτηριστικά τυπικά των διαφοροποιημένων ηπατοκυττάρων, συμπεριλαμβανομένης της παραγωγής αλβουμίνης, τρανσφερρίνης και άλλων ειδικών για το ήπαρ πρωτεϊνών, γεγονός που τα καθιστά ανεκτίμητη πηγή για την έρευνα στην τοξικολογία, τον μεταβολισμό των φαρμάκων και τις ηπατικές νόσους.

Η κυτταρική σειρά δημιουργήθηκε από ηπατοκύτταρα που απομονώθηκαν από ποντίκι που έφερε διαγονίδιο για τον ανθρώπινο μετασχηματιστικό αυξητικό παράγοντα άλφα (TGF-άλφα), υπό τον έλεγχο του υποκινητή της μεταλλοθειονίνης-ι ποντικού. Αυτή η γενετική μεταβολή συμβάλλει στην αθανασία των κυττάρων χωρίς να διαταράσσεται η διαφοροποιημένη κατάστασή τους. Τα κύτταρα AML12 διατηρούν σταθερό φαινότυπο και καρυότυπο υπό τυπικές συνθήκες κυτταροκαλλιέργειας, οι οποίες περιλαμβάνουν μια μοναδική απαίτηση για δεξαμεθαζόνη και ινσουλίνη-τρανσφερρίνη-σελήνιο στο μέσο ανάπτυξης για την προώθηση του πολλαπλασιασμού και τη διατήρηση των ειδικών για τα ηπατοκύτταρα λειτουργιών.

Ιστός
Ήπαρ
Εφαρμογές
τρισδιάστατη κυτταρική καλλιέργεια, διαλογή υψηλής απόδοσης, Τοξικολογία
Συνώνυμα
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Κατάσταση όσον αφορά τους ΓΤΟ
GMO-S1
Λεπτομέρειες σχετικά με την κατάσταση των ΓΤΟ
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιακό
Τύπος κυττάρου
Ηπατοκύτταρα

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
AML12 (αριθμός καταλόγου Cytion 300643)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0140

05Έκφραση και ευαισθησία

Προϊόντα
Τα κύτταρα εκφράζουν υψηλά επίπεδα ανθρώπινου TGF άλφα και χαμηλότερα επίπεδα TGF άλφα ποντικού.

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L γλυκόζη, w: 2,5 mM L-γλουταμίνη, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM πυρουβικό νάτριο, w: 1,2 g/L NaHCO3 (αριθμός άρθρου Cytion 820400a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS, 10 μικρογραμμάρια/ml ινσουλίνης, 5,5 μικρογραμμάρια/ml τρανσφερρίνης, 5 ng/ml σεληνίου, 40 ng/ml δεξαμεθαζόνης
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
CD-1 MT42 διαγονιδιακό
Ηλικία δωρητή
3 μήνες