İçeriğe atla
AML12
Doku
Karaciğer
Eş anlamlılar
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

AML12

Cell line · Ürün numarası 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

Alpha Mouse Liver 12 hücreleri olarak da bilinen AML12 hücreleri, transgenik bir farenin karaciğerinden türetilen tümörijenik olmayan epitelyal bir hücre hattıdır. Bu hücreler başlangıçta yetişkin farenin hepatosit fonksiyonu ve karaciğer biyolojisini incelemek için uygun bir in vitro model sağlamak üzere geliştirilmiştir. AML12 hücreleri, albümin, transferrin ve diğer karaciğere özgü proteinlerin üretimi de dahil olmak üzere farklılaşmış hepatositlerin tipik özelliklerini ifade ederek onları toksikoloji, ilaç metabolizması ve karaciğer hastalığı araştırmaları için paha biçilmez bir kaynak haline getirir.

Hücre hattı, fare metallothionein-I promotörünün kontrolü altında insan dönüştürücü büyüme faktörü alfa (TGF-alfa) için bir transgen barındıran bir fareden izole edilen hepatositlerden oluşturulmuştur. Bu genetik değişiklik, hücrelerin farklılaşmış durumlarını bozmadan ölümsüzleşmelerine katkıda bulunur. AML12 hücreleri, standart hücre kültürü koşulları altında kararlı bir fenotip ve karyotip sürdürür; bu, çoğalmayı teşvik etmek ve hepatosit spesifik işlevleri sürdürmek için büyüme ortamında deksametazon ve insülin-transferrin-selenyum için benzersiz bir gereksinim içerir.

Doku
Karaciğer
Uygulamalar
3D hücre kültürü, Yüksek verimli tarama, Toksikoloji
Eş anlamlılar
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Sınıflandırma

Canlı
Fare
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Hücre türü
Hepatosit

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
AML12 (Cytion katalog numarası 300643)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05İfade ve duyarlılık

Ürünler
Hücreler yüksek düzeyde insan TGF alfası ve daha düşük düzeyde fare TGF alfası ifade eder.

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 g/L Glukoz, w: 2.5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0.5 mM Sodyum piruvat, w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820400a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortama %10 FBS, 10 mikrogram/mL insülin, 5,5 mikrogram/mL transferrin, 5 ng/mL selenyum, 40 ng/mL deksametazon ekleyin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Tür / alt tür
CD-1 MT42 transgenik
Bağışçının yaşı
3 ay