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AML12
Tissue
Hígado
Synonyms
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

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AML12

Cell line · Product number 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

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01General information

Description

Las células AML12, también conocidas como células Alpha Mouse Liver 12, son una línea celular epitelial no tumorigénica derivada del hígado de un ratón transgénico. Estas células se desarrollaron inicialmente para proporcionar un modelo in vitro adecuado para el estudio de la función de los hepatocitos y la biología hepática del ratón adulto. Las células AML12 expresan características típicas de los hepatocitos diferenciados, incluida la producción de albúmina, transferrina y otras proteínas específicas del hígado, lo que las convierte en un recurso invaluable para la investigación en toxicología, metabolismo de fármacos y enfermedades hepáticas.

La línea celular se estableció a partir de hepatocitos aislados de un ratón portador de un transgén para el factor de crecimiento transformante alfa humano (TGF-alfa), bajo el control del promotor de la metalotioneína-I de ratón. Esta alteración genética contribuye a la inmortalización de las células sin alterar su estado diferenciado. Las células AML12 mantienen un fenotipo y un cariotipo estables en condiciones estándar de cultivo celular, lo que incluye un requisito único de dexametasona e insulina-transferrina-selenio en el medio de crecimiento para promover la proliferación y mantener las funciones específicas de los hepatocitos.

Tissue
Hígado
Applications
Cultivo celular en 3D, cribado de alto rendimiento, toxicología
Synonyms
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Classification

Organism
Mouse
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Epithelial
Cell type
Hepatocito

04Identifiers

Citation
AML12 (número de catálogo de Cytion 300643)
NCBI TaxID
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Expression and susceptibility

Products
Las células expresan niveles elevados de TGF alfa humano y niveles más bajos de TGF alfa de ratón.

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:F12 de Ham (1:1), p/v: 3,1 g/L de glucosa, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, p: 0,5 mM de piruvato de sodio, p: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artículo de Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

Supplements
Añada al medio un 10 % de FBS, 10 microgramos/mL de insulina, 5,5 microgramos/mL de transferrina, 5 ng/mL de selenio y 40 ng/mL de dexametasona
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Retira el medio usado de las células adheridas y lávalas con PBS sin calcio ni magnesio. Para los frascos T25, usa de 3 a 5 ml de PBS, y para los frascos T75, usa de 5 a 10 ml. Luego, cubra las células por completo con Accutase, utilizando de 1 a 2 ml para los frascos T25 y 2,5 ml para los frascos T75. Deje que las células se incuben a temperatura ambiente durante 8 a 10 minutos para desprenderse. Después de la incubación, mezcla suavemente las células con 10 ml de medio para resuspendarlas; luego, centrifuga a 300xg durante 3 minutos. Deseche el sobrenadante, resuspenda las células en medio fresco y transfiéralas a frascos nuevos que ya contengan medio fresco.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Freeze medium
Como medio de criopreservación, utilizamos un medio de crecimiento completo (que incluye FBS) + 10 % de DMSO para garantizar una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo de Cytion 800100), que incluye osmoprotectores y estabilizadores metabólicos optimizados para mejorar la recuperación y reducir el estrés inducido por la criopreservación.
Storage conditions

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Shipping conditions

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

08Donor

Breed / subspecies
Transgénico CD-1 MT42
Donor age
3 meses