Mine otse sisu juurde
AML12
Kude
Maksa
Sünonüümid
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumendid

AML12

Cell line · Toote number 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

AML12 rakud, mida tuntakse ka kui Alpha Mouse Liver 12 rakke, on transgeense hiire maksast saadud mittekasvajalik epiteelirakuliin. Need rakud töötati algselt välja selleks, et pakkuda sobivat in vitro mudelit täiskasvanud hiire hepatotsüütide funktsiooni ja maksa bioloogia uurimiseks. AML12 rakud väljendavad diferentseeritud hepatotsüütidele iseloomulikke omadusi, sealhulgas albumiini, transferriini ja teiste maksaspetsiifiliste valkude tootmist, mis teeb neist hindamatu ressursi toksikoloogia, ravimite metabolismi ja maksahaiguste uurimisel.

Rakuliin loodi hiirest isoleeritud hepatotsüütidest, mis sisaldasid inimese transgeeni transformeeriva kasvufaktori alfa (TGF-alfa) jaoks, mis on kontrollitud hiire metallotionein-I promootori abil. See geneetiline muudatus aitab kaasa rakkude immortaliseerimisele ilma nende diferentseeritud seisundit häirimata. AML12 rakud säilitavad stabiilse fenotüübi ja karüotüübi standardsetel rakukultuuritingimustel, mis hõlmab ainulaadset vajadust deksametasooni ja insuliin-transferriin-seleeniumi järele kasvukeskkonnas, et soodustada proliferatsiooni ja säilitada hepatotsüütidele omaseid funktsioone.

Kude
Maksa
Rakendused
3D rakukultuur, kõrgläbivaatamine, toksikoloogia, kõrge läbilaskevõimega sõelumine
Sünonüümid
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Rakutüüp
Hepatotsüüdid

04Tunnused

Viide
AML12 (Cytioni katalooginumber 300643)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Tooted
Rakud ekspresseerivad suurel määral inimese TGF alfa ja madalamal määral hiire TGF alfa.

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L glükoosi, w: 2,5 mM L-glutamiini, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM naatriumpüruvaati, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820400a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS, 10 mikrogrammi/ml insuliini, 5,5 mikrogrammi/ml transferriini, 5 ng/ml seleeni, 40 ng/ml deksametasooni
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Tõug / alamliik
CD-1 MT42 transgeenne
Doonori vanus
3 kuud