Pāriet uz saturu
AML12
Audums
Aknas
Sinonīmi
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

Dokumenti

AML12

Cell line · Preces numurs 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

€600.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

AML12 šūnas, pazīstamas arī kā Alpha Mouse Liver 12 šūnas, ir epitēlija šūnu līnija, kas nav tumoroģēna un iegūta no transgēno peļu aknām. Šīs šūnas sākotnēji tika izstrādātas, lai nodrošinātu piemērotu in vitro modeli pieaugušas peles hepatocītu funkcijas un aknu bioloģijas izpētei. AML12 šūnām piemīt diferencētiem hepatocītiem raksturīgas īpašības, tostarp albumīna, transferīna un citu aknām specifisku olbaltumvielu ražošana, tāpēc tās ir nenovērtējams resurss toksikoloģijas, zāļu metabolisma un aknu slimību pētījumiem.

Šūnu līnija tika izveidota no hepatocītiem, kas izolēti no peles, kurā ir cilvēka transformējošā augšanas faktora alfa (TGF-alfa) transgēns, ko kontrolē peles metaltioneīna-I promotors. Šī ģenētiskā izmaiņa veicina šūnu imortalizāciju, neizjaucot to diferencēto stāvokli. AML12 šūnas saglabā stabilu fenotipu un kariotipu standarta šūnu kultūras apstākļos, kas ietver unikālu prasību pēc deksametazona un insulīna-transferīna-selēna augšanas vidē, lai veicinātu proliferāciju un saglabātu hepatocītiem specifiskas funkcijas.

Audums
Aknas
Pieteikumi
3D šūnu kultūras, augstas veiktspējas skrīnings, toksikoloģija
Sinonīmi
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Šūnu tips
Hepatocīti

04Identifikatori

Atsauce
AML12 (Cytion kataloga numurs 300643)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Pazīmes un uzņēmība

Produkti
Šūnās ir augsts cilvēka TGF alfa līmenis un zemāks peles TGF alfa līmenis.

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS, 10 mikrogramiem/ml insulīna, 5,5 mikrogramiem/ml transferīna, 5 ng/ml selēna, 40 ng/ml deksametazona
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Šķirne / pasuga
CD-1 MT42 transgēnu
Donora vecums
3 mēneši