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AML12
Pañuelo de papel
Hígado
Sinónimos
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

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AML12

Cell line · Número de producto 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

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01Información general

Descripción

Las células AML12, también conocidas como células Alpha Mouse Liver 12, son una línea celular epitelial no tumorigénica derivada del hígado de un ratón transgénico. Estas células se desarrollaron inicialmente para proporcionar un modelo in vitro adecuado para estudiar la función hepatocitaria y la biología hepática del ratón adulto. Las células AML12 expresan características típicas de los hepatocitos diferenciados, incluida la producción de albúmina, transferrina y otras proteínas específicas del hígado, lo que las convierte en un recurso inestimable para la investigación en toxicología, metabolismo de fármacos y enfermedades hepáticas.

La línea celular se estableció a partir de hepatocitos aislados de un ratón que albergaba un transgén para el factor de crecimiento transformante humano alfa (TGF-alfa), bajo el control del promotor de la metalotioneína-I de ratón. Esta alteración genética contribuye a la inmortalización de las células sin alterar su estado diferenciado. Las células AML12 mantienen un fenotipo y un cariotipo estables en condiciones de cultivo celular estándar, lo que incluye un requisito único de dexametasona e insulina-transferrina-selenio en el medio de crecimiento para promover la proliferación y mantener las funciones específicas de los hepatocitos.

Pañuelo de papel
Hígado
Aplicaciones
cultivo celular 3D, Cribado de alto rendimiento, Toxicología
Sinónimos
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02Clasificación

Organismo
Ratón
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Situación respecto a los OMG
GMO-S1
Detalles sobre la presencia de OMG
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
Epitelial
Tipo de célula
Hepatocitos

04Identificadores

Referencia
AML12 (número de catálogo 300643 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0140

05Expresión y susceptibilidad

Productos
Las células expresan altos niveles de TGF alfa humano y niveles más bajos de TGF alfa de ratón.

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L de glucosa, w: 2,5 mM de L-glutamina, w: 15 mM de HEPES, w: 0,5 mM de piruvato sódico, w: 1,2 g/L de NaHCO3 (número de artículo de Cytion 820400a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Suplementar el medio con 10% de FBS, 10 microgramos/mL de insulina, 5,5 microgramos/mL de transferrina, 5 ng/mL de selenio, 40 ng/mL de dexametasona
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Raza / subespecie
CD-1 MT42 transgénico
Edad del donante
3 meses