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AML12
ティッシュ
肝臓
同義語
AML-12, AML 12, Alpha Mouse Liver 12

AML12

Cell line · 製品番号 300643

AML12 cells, also known as Alpha Mouse Liver 12 cells, are a non-tumorigenic epithelial cell line derived from the liver of a transgenic mouse. These cell...

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01概要

説明

AML12細胞(Alpha Mouse Liver 12細胞としても知られる)は、トランスジェニックマウスの肝臓に由来する非腫瘍性の上皮細胞株である。この細胞は当初、成体マウスの肝細胞機能と肝臓生物学を研究するのに適したin vitroモデルを提供するために開発された。AML12細胞は、アルブミン、トランスフェリン、その他の肝臓特異的タンパク質の産生など、分化した肝細胞に典型的な特徴を発現しており、毒性学、薬物代謝、肝臓疾患などの研究において貴重なリソースとなっている。

この細胞株は、マウスメタロチオネイン-Iプロモーターの制御下にある、ヒト形質転換成長因子α(TGF-α)のトランスジーンを保有するマウスから単離された肝細胞から樹立された。この遺伝子改変は、分化状態を破壊することなく細胞の不死化に寄与している。AML12細胞は、標準的な細胞培養条件下で安定した表現型と核型を維持するが、これには、増殖を促進し肝細胞特異的機能を維持するために、増殖培地中のデキサメタゾンとインスリン-トランスフェリン-セレニウムに対するユニークな要求が含まれる。

ティッシュ
肝臓
用途
3次元細胞培養、ハイスループットスクリーニング、毒性学
同義語
  • AML-12
  • AML 12
  • Alpha Mouse Liver 12

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This murine hepatocyte cell line (AML12) contains a human TGF-α transgene introduced by transfection, enabling growth-factor-dependent signaling studies. The insert is stably integrated into hepatocytic cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮
細胞の種類
肝細胞

04識別子

引用
AML12 (Cytion カタログ番号 300643)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_0140

05発現と感受性

製品
この細胞は高レベルのヒトTGFαを発現し、低レベルのマウスTGFαを発現する。

06取り扱いと飼育

培地
DMEM:Ham's F12 (1:1)、w: 3.1 g/Lグルコース、w: 2.5 mM L-グルタミン、w: 15 mM HEPES、w: 0.5 mMピルビン酸ナトリウム、w: 1.2 g/L NaHCO3 (Cytion製品番号820400a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10%FBS、10μg/mLインシュリン、5.5μg/mLトランスフェリン、5ng/mLセレン、40ng/mLデキサメタゾンを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
CD-1 MT42トランスジェニック
ドナーの年齢
3ヶ月